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出身于化學世家的謝曉亮教授成名已久,據(jù)稱他是哈佛大學僅有的兩位來自中國大陸的終身教授之一,這位科學家在單分子光譜檢測及其在生命科學中的應用方面作出了許多貢獻,曾獲得多個獎項,2010年成為了中國化學會*華裔榮譽會士。
在的Nature Methods雜志上,謝曉亮研究組再次發(fā)表文章:RNAi screening for fat regulatory genes with SRS microscopy,提出了利用其研究組自身研發(fā)的技術(shù)——受激拉曼散射(stimulated Raman scattering,SRS)顯微技術(shù)進行RNA干擾實驗的新方法。
這種新方法利用無需熒光標記的受激拉曼散射顯微儀進行定量成像,克服了生化分析方法繁瑣的色譜分析等問題,以及CARS顯微方法背景信號高,結(jié)果不等問題,是一種簡單,適用于高通量分析的新技術(shù)。在這篇文章中,研究人員就利用這種方法篩選發(fā)現(xiàn)了8個在脂肪儲存調(diào)控方面的新調(diào)控因子。
肥胖是現(xiàn)代社會的一大病癥,肥胖會引起各種慢性疾病,比如II型糖尿病,心血管疾病等等。為了更好的了解肥胖,及其相關的代謝失序問題,我們需要深入分析脂肪在細胞水平和組織水平堆積的調(diào)控機制,目前已經(jīng)進行了一些模式生物的脂肪儲存調(diào)控因子的全基因組分析,但是這些還遠遠不夠。
一般線蟲脂肪儲存調(diào)控因子分析方法主要包括傳統(tǒng)的生物化學分析方法,比如進行線蟲的固定染色,熒光成像等,近期一些研究組報道了利用CARS顯微技術(shù)來分析。但是這兩種方法都存在一些局限性,生化分析方法需要從線蟲中提取脂肪,進行繁瑣的色譜分析工作,這在基因組水平上是不可能完成,而且使用到的一些有機溶劑也會干擾實驗分析。而利用CARS顯微技術(shù)進行分析又存在背景信號高,靈敏度受限等問題。
這篇文章應用的SRS顯微技術(shù)能通過對激光迅速反應,調(diào)制來去除背景噪音,從而不僅能夠得到與傳統(tǒng)拉曼光譜一樣的譜圖,而且信號強度高了幾個數(shù)量級,利用這種方法和RNAi篩選相結(jié)合,研究人員就能在生理條件下尋找脂肪儲存調(diào)控基因了,經(jīng)過實驗分析,研究人員從272個基因中找到了9個關鍵調(diào)控因子。
將SRS顯微技術(shù)與RNAi技術(shù)結(jié)合起來,能幫助研究人員在線蟲的活性生理條件下觀察脂肪代謝調(diào)控,而且這種方法無需標記,極大的簡化了樣品準備過程,適用于模式生物的細胞追蹤,也有利用高通量篩選分析。
原文摘要:
RNAi screening for fat regulatory genes with SRS microscopy
Identification of genes regulating fat accumulation is important for basic and medical research; genetic screening for those genes in Caenorhabditis elegans, a widely used model organism, requires in vivo quantification of lipids. We demonstrated RNA interference screening based on quantitative imaging of lipids with label-free stimulated Raman scattering (SRS) microscopy, which overcomes major limitations of coherent anti-Stokes Raman scattering microscopy. Our screening yielded eight new genetic regulators of fat storage.
來源:生物通
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