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人髓過氧化物酶(MPO)ELISA Kit

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產(chǎn)品型號YF2946

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時(shí)間:2017-07-31 05:01:58瀏覽次數(shù):204次

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人髓過氧化物酶(MPO)ELISA Kit
上海逸峰生物科技有限公司*經(jīng)營Elisa試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材、抗體、細(xì)胞等生物化學(xué)試劑。還代理不同品牌價(jià)格檔次的ELISA試劑盒。價(jià)格實(shí)惠,質(zhì)量有保證,信譽(yù)*。敬請咨詢! : :

人髓過氧化物酶(MPO)ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T

上海逸峰生物科技有限公司*提供各種種屬、各種系列Elisa檢測試劑盒,價(jià)格實(shí)惠,質(zhì)量有保證,信譽(yù)*。索取各Elisa試劑盒產(chǎn)品說明書。凡購買目錄本公司Elisa試劑盒可免費(fèi)提供代測服務(wù)。 本公司的更多產(chǎn)品,請點(diǎn)擊公司:http://www.yfswbio.com/

Elisa試劑盒說明

1.試劑盒保存:-20(較長時(shí)間不用時(shí));2-8(頻繁使用時(shí))。

2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

3.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

4.中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。

Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗LEP抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗LEP抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的LEP呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。

試劑盒組成及試劑配制

1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。

3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4. *標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6. *標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1100

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1100

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

 

Elisa試劑盒標(biāo)本的稀釋原則:

首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為10ng/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋10 ng/ml,5 ng/ml,2.5ng/ml,1.25 ng/ml0.625ng/ml,0.312ng/ml0.156 ng/ml.

,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。

如配制5ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml10ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

*標(biāo)記抗體的稀釋原則:

臨用前以*標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl*標(biāo)記抗體加990μl*標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:

臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

Elisa試劑盒需要而未提供的試劑和器材

1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

2. 高速離心機(jī)

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時(shí),用多通道移液器

6. 蒸餾水,容量瓶等

標(biāo)本的采集及保存

1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

 

 

注意事項(xiàng)

1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。

2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。

3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。

5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計(jì)算時(shí)請zui后乘以稀釋倍數(shù)。

6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時(shí),請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。

7. 底物請避光保存。

8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

 

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