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胚胎干細(xì)胞的復(fù)蘇方法

時間:2015/6/4閱讀:242
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復(fù)蘇細(xì)胞
細(xì)胞被凍存在10%二甲基亞砜(DMSO)中防止結(jié)晶的形成,結(jié)晶的形成會損害細(xì)胞。然而,二甲基亞砜對細(xì)胞有毒性,快速的進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇是很重要的。

步驟:
1.從液氮中取出一管細(xì)胞;
2.將凍存管置于37℃水浴中2分鐘(或放到管內(nèi)溶液恰好*溶解);
3.將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到一15ml Falcon管中;
4.加入5ml ES培養(yǎng)基(用培養(yǎng)基沖洗凍存管);
5.離心3分鐘;
6.棄上清,用2ml ES培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,至少吹打10次;
7.接種在明膠包被(見下文)的6孔或6cm組織培養(yǎng)皿;
8.孵育。

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