來自徐州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院的研究人員為了解栽培種甘薯的染色體結(jié)構(gòu),利用45S rDNA熒光原位雜交、自身基因組熒光原位雜交和銀染技術(shù)對(duì)栽培種甘薯進(jìn)行分子細(xì)胞遺傳學(xué)研究。
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是一種物理圖譜繪制方法,使用熒光素標(biāo)記探針,以檢測探針和分裂中期的染色體或分裂間期的染色質(zhì)的雜交。這種方法是在20世紀(jì)80年代末在放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性分子細(xì)胞遺傳技術(shù),以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導(dǎo)分子(reporter molecule)結(jié)合,雜交后再通過免疫細(xì)胞化學(xué)過程連接上熒光染料。
研究人員通過熒光原位雜交技術(shù),發(fā)現(xiàn)基因組DNA對(duì)自身染色體的不均勻雜交在植物中可能是普遍存在的。在高等植物基因組內(nèi),絕大多數(shù)雜交信號(hào)強(qiáng)烈的區(qū)域除了 45S rDNA 等區(qū)域外,應(yīng)當(dāng)富含重復(fù)序列,即為基因貧乏區(qū),而輕度標(biāo)記或者非標(biāo)記的區(qū)域則應(yīng)當(dāng)是基因富集區(qū)。因此,自身基因組熒光原位雜交技術(shù)可以用來揭示植物基因組重復(fù)序列和基因在染色體水平上的組織情況。
在這篇文章中,研究人員采用 Ag-NOR 技術(shù)、rDNA 熒光原位雜交(rDNA-FISH)、自身基因組原位雜交(Self-GISH)等技術(shù)綜合研究栽培種甘薯(徐薯 18)染色體,分析其染色體結(jié)構(gòu)和 45SrDNA 位點(diǎn)的分布,對(duì)于進(jìn)一步了解栽培種甘薯(徐薯 18)的遺傳背景、比較分析甘薯屬植物染色體多倍化進(jìn)程具有很好的指導(dǎo)意義,并為甘薯品種的遺傳改良提供細(xì)胞及分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)。