原位雜交結(jié)合免疫組織化學(xué)技術(shù)可以分別在相鄰的連續(xù)切片上進(jìn)行。只要在相鄰切片上能得到同一細(xì)胞的連續(xù)切面。對照觀察相鄰切片上同一細(xì)胞切面原位雜交和免疫組織化學(xué)結(jié)果，就可以判斷在同一細(xì)胞內(nèi)是否存在特定的靶核酸DNA或RNA和由該基因或另一種基因編碼的蛋白質(zhì)或多肽。

    原位雜交結(jié)合免疫組織化學(xué)技術(shù)更多的是在同一細(xì)胞標(biāo)本或組織切片上進(jìn)行，這樣可避免因相鄰切片法觀察時不易找到同一細(xì)胞的切面而產(chǎn)生的空間誤差和樣本誤差。但采用同一切片的雙標(biāo)記技術(shù)時。*次標(biāo)記染色過程總要或多或少地影響第二次標(biāo)記染色的結(jié)果，使第二次染色結(jié)果不很理想。

    細(xì)胞和切片標(biāo)本先用特異性抗體經(jīng)免疫組織化學(xué)檢測其中的相應(yīng)抗原成分．接著用核酸探針做原位雜交，顯示同一細(xì)胞或標(biāo)本內(nèi)的DNA或mRNA。免疫組織化學(xué)技術(shù)多用ABC法，顯色劑可用DAB、PPD(Para-phenylenediamine)或AEC(3―amino-9―ethyl-carbazole)。當(dāng)與放射性核素的原位雜交結(jié)合時，DAB或PPD顯色所呈的棕褐色或棕黑色陽性產(chǎn)物在隨后的原位雜交的操作過程中比較穩(wěn)定，不會褪色。如果用AEC作顯色劑，陽性產(chǎn)物呈紅色，它與原位雜交放射自顯影的陽性信號黑色銀粒對比更加鮮明，易于在同一細(xì)胞內(nèi)分辨出來。但由于AEC的陽性產(chǎn)物能溶于乙醇等有機(jī)溶劑，因此在隨后的原位雜交操作過程中不能用乙醇脫水，可代之以空氣干燥。

    免疫組織化學(xué)若與*等非放射性標(biāo)記探針的原位雜交相結(jié)合。在選擇檢測系統(tǒng)時應(yīng)考慮到兩個系統(tǒng)之間是否存在相互干擾。再者，在選用顯色劑時，免疫組織化學(xué)和原位雜交zui終的兩種成色陽性產(chǎn)物應(yīng)易于分辨。

    *行免疫組織化學(xué)反應(yīng)。后進(jìn)行原位雜交。通?？乖茌^好地顯示，但靶核酸有可能在進(jìn)行免疫組織化學(xué)的過程中易于遭到破壞。當(dāng)靶核酸是mRNA時，則要求整個免疫組織化學(xué)染色過程必須在無RNA酶的條件下進(jìn)行。