免疫組織化學(xué)簡介
免疫組織化學(xué)又稱免疫細胞化學(xué),是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng),對相應(yīng)炕原進行定性、定位、定量測定的一項新技術(shù)。它把免疫反應(yīng)的特異性、組織化學(xué)的可見性巧妙地結(jié)合起來,借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用,在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、多肽、酶、激素、病原體以及受體等)。
免疫組化技術(shù)的基本原理
免疫組化技術(shù)是一種綜合定性、定位和定量;形態(tài)、機能和代謝密切結(jié)合為一體的研究和檢測技術(shù)。在原位檢測出病原的同時,還能觀察到組織病變與該病原的關(guān)系,確認受染細胞類型,從而有助于了解疾病的發(fā)病機理和病理過程。
免疫酶組化技術(shù)是通過共價鍵將酶連接在抗體上,制成酶標(biāo)抗體,再借酶對底物的特異催化作用,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,于普通顯微鏡或電鏡下進行細胞表面及細胞內(nèi)各種抗原成分的定位,根據(jù)酶標(biāo)記的部位可將其分為直接法(一步法)、間接法(二步法)、橋聯(lián)法(多步法)等,用于標(biāo)記的抗體可以是用免疫動物制備的多克隆抗體或特異性單克隆抗體,是特異性強的價的單克隆抗體。直接法是將酶直接標(biāo)記在*抗體上,間接法是將酶標(biāo)記在第二抗體上,檢測組織細胞內(nèi)的特定抗原物質(zhì)。目前通常選用免疫酶組化間接染色法。