貼壁細(xì)胞原位轉(zhuǎn)染

    貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染是生命科學(xué)家們一直以來都比較頭疼的問題，尤其是基于電穿孔的原理將外源DNA向貼壁細(xì)胞的導(dǎo)入。即可對(duì)培養(yǎng)在24孔板中的細(xì)胞在生長周期中的任意階段進(jìn)行貼壁轉(zhuǎn)染，無需任何物理或化學(xué)消化。這就克服了傳統(tǒng)的電穿孔將貼壁細(xì)胞懸浮影響其本身的生理狀態(tài)的障礙。這種轉(zhuǎn)染模式不僅適用于新鮮分離培養(yǎng)中的貼壁細(xì)胞，而且對(duì)于凍存的貼壁細(xì)胞如原代神經(jīng)元的轉(zhuǎn)染也大有裨益。因?yàn)榭梢栽趶?fù)蘇后培養(yǎng)的任意生命階段進(jìn)行轉(zhuǎn)染。zui先商品化的為AD1 4D-Nucleofector? Y kit,適用于原代神經(jīng)細(xì)胞的貼壁轉(zhuǎn)染。如原代神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、以及神經(jīng)干細(xì)胞等。根據(jù)不同的神經(jīng)細(xì)胞類型，培養(yǎng)條件以及培養(yǎng)時(shí)間的不同，轉(zhuǎn)染效率在20%-70%之間。

應(yīng)用:  24孔板內(nèi)原代神經(jīng)元的貼壁轉(zhuǎn)染

    轉(zhuǎn)染前，神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)在標(biāo)準(zhǔn)的24孔培養(yǎng)板內(nèi)。轉(zhuǎn)染時(shí)，棄細(xì)胞培養(yǎng)液，加入轉(zhuǎn)染液并將24孔電極板插入24孔培養(yǎng)板。將此三明治結(jié)構(gòu)的板放入4D Y unit進(jìn)行轉(zhuǎn)染。24個(gè)孔可設(shè)置24個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)染程序。

4D Nucleofector—的靈活性

1. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量的靈活性：轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量在2×10^4-2×10^7個(gè)cells/反應(yīng)

2. 轉(zhuǎn)染通量的靈活性：可1-24之間任意通量；更可升級(jí)96 shuttle實(shí)現(xiàn)96的高通量

3. 轉(zhuǎn)染耗材的靈活性：既可電轉(zhuǎn)杯，也可電極條板，又可標(biāo)準(zhǔn)24孔板

4. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞狀態(tài)的靈活性：既可懸浮細(xì)胞，又可貼壁細(xì)胞原位轉(zhuǎn)染