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動物細(xì)胞

時間:2016/4/6閱讀:296
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 在合成培養(yǎng)基的發(fā)展過種有幾點(diǎn)成功之處:可替代血清;針對不同類型的細(xì)胞制備zui適宜的培養(yǎng)基(例如:RPMI1640適合于類成淋巴細(xì)胞系);根據(jù)特殊的條件修正培養(yǎng)基(例如:Leibovitz L15不需要加入CO2和NaHCO3[Leibovitz,1963]).

   分離和繁殖某種特殊類型的細(xì)胞可能需要一種選擇性的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基;而為了得到產(chǎn)物所進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)(例如將細(xì)胞作為病毒繁殖的宿主,或?qū)⒓?xì)胞用于非細(xì)胞特異性的分子生物學(xué)研究)則主要依賴于添加血清的Eagle’s MEM[Eagle1959]以及Dulbecco改良的DMEM[Dulbecco and Freerman,1959]或者是現(xiàn)在更多使用的RPMI1640[Moore et al.,1967].

然而許多工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)現(xiàn)在使用的是無血清培養(yǎng)基,這樣做有利于產(chǎn)物的下游處理并可減少外來污染.在許多實(shí)驗(yàn)室還流行一種折中的方法:即將一種成分復(fù)雜的培養(yǎng)基(例如Ham’s F12[Ham,1965])與一種氨基酸和維生素含量較高的培養(yǎng)基(例如:DMEM)混合使用.

   這種培養(yǎng)基不利于純化產(chǎn)物,人ELISA試劑盒純度很高,對于原代培養(yǎng)以及細(xì)胞系的繁殖卻可以產(chǎn)生多方面的促進(jìn)作用.

   動物細(xì)胞體外大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)是在人工條件下,設(shè)定pH、溫度、溶氧等,在細(xì)胞培養(yǎng)載體(容器)中高密度大量培養(yǎng)動物細(xì)胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。常用的大規(guī)模培養(yǎng)的動物細(xì)胞有雞胚成纖維細(xì)胞、原代地鼠腎細(xì)胞等多種元代細(xì)胞,及*、CHO細(xì)胞、Vero細(xì)胞等。這些細(xì)胞在疫苗生產(chǎn)、單抗制備、紅細(xì)胞生成素等產(chǎn)品領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。

   目前常用的細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法有轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng),細(xì)胞工廠培養(yǎng),生物反應(yīng)器培養(yǎng)等。轉(zhuǎn)瓶技術(shù)為傳統(tǒng)的貼壁細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),細(xì)胞接種在旋轉(zhuǎn)的圓筒形培養(yǎng)器-轉(zhuǎn)瓶中,培養(yǎng)過程中轉(zhuǎn)瓶不斷旋轉(zhuǎn),使細(xì)胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)基具有結(jié)構(gòu)簡單,投資少,技術(shù)成熟,放大只需簡單的增加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點(diǎn)。但也有其缺點(diǎn):勞動強(qiáng)度大,占地空間大,單位體積提供細(xì)胞生長的表面積小,細(xì)胞生長密度低,瓶間差異較難控制等,因而難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)模化生產(chǎn)。

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