培養(yǎng)基:按照微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì),人工配制而成的營養(yǎng)基質(zhì).
1.1培養(yǎng)基的設(shè)計原則
1)目標(biāo)明確(微生物類型、種子、發(fā)酵、分離、保藏)
明確培養(yǎng)基的用途,如用于培養(yǎng)何種微生物,培養(yǎng)的目的如何,是培養(yǎng)菌種還是用于發(fā)酵生產(chǎn),發(fā)酵生產(chǎn)的目的是獲得大量菌體還是獲得次級代謝產(chǎn)物等,根據(jù)不同的菌種及其不同的培養(yǎng)目的確定搭配的營養(yǎng)成分及營養(yǎng)比例.
營養(yǎng)的要求主要是對碳素和氮素的性質(zhì),如果是自養(yǎng)型的微生物則主要考慮無機碳源,如果是異樣型的微生物,主要提供有機碳源物質(zhì);除碳源物質(zhì)外,還要考慮加入適量的無機礦物質(zhì)元素;有些微生物菌種在培養(yǎng)時還要求加入一定的生長因子,如很多乳酸菌在培養(yǎng)時,要求在培養(yǎng)基中加入一些氨基酸和維生素等才能很好地生長.
2)營養(yǎng)協(xié)調(diào)
--6大營養(yǎng)要素的適合比例
--尤其C/N比 (分離:細菌約4/1;酵母約6/1;霉菌約8/1)
除營養(yǎng)物質(zhì)要求外,還要考慮營養(yǎng)成分的比例適當(dāng),其中碳素營養(yǎng)與氮素營養(yǎng)的比例很重要.C/N 比是指培養(yǎng)基中所含 C 原子的摩爾濃度與 N 原子的摩爾濃度之比,不同的微生物菌種要求不同的 C/N 比,同一菌種,在不同的生長時期也有不同的要求,一般 C/N 比在配制發(fā)酵生產(chǎn)用培養(yǎng)基時,要求比較嚴(yán)格,C/N 比例對發(fā)酵產(chǎn)物的積累影響很大;一般在發(fā)酵工業(yè)上,發(fā)酵用種子的培養(yǎng),培養(yǎng)基的營養(yǎng)越豐富越好,尤其是 N 源要豐富,而對以積累次級代謝產(chǎn)物為發(fā)酵目的的發(fā)酵培養(yǎng)基,則要求提高 C/N 比值,提高 C 素營養(yǎng)物質(zhì)的含量.
3)合適的理化條件
除營養(yǎng)成分外,培養(yǎng)基的理化條件也直接影響微生物的生長和正常代謝.
◆ pH(內(nèi)源調(diào)節(jié)、外源調(diào)節(jié))
微生物一般都有它們適宜的生長pH 范圍,細菌的zui適pH 一般在pH 8范圍,放線菌要求pH 7.8.5范圍,酵母菌要求pH 3.6.0,霉菌的適宜pH 為4.5.8.
由于微生物在代謝過程中,不斷地向培養(yǎng)基中分泌代謝產(chǎn)物,影響培養(yǎng)基的pH變化,對大多數(shù)微生物來說,主要產(chǎn)生酸性產(chǎn)物,所以在培養(yǎng)過程中常引起pH的下降,影響微生物的生長繁殖速度.為了盡可能地減緩在培養(yǎng)過程中pH的變化,在配制培養(yǎng)基時,要加入一定的緩沖物質(zhì),通過培養(yǎng)基中的這些成分發(fā)揮調(diào)節(jié)作用,常用的緩沖物質(zhì)主要有以下兩類:
3)合適的理化條件
除營養(yǎng)成分外,培養(yǎng)基的理化條件也直接影響微生物的生長和正常代謝.