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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第2年

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細(xì)胞生物學(xué)試劑

熒光顯微鏡標(biāo)本制作的要求

時(shí)間:2011/3/21閱讀:1543
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熒光顯微鏡標(biāo)本制作的要求

載玻片
載玻片厚度應(yīng)在0.8~L 2mm之間,太厚的玻片,一方面光吸收多,另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚焦。載玻片必須光潔,厚度均勻,無(wú)明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英載玻片。

蓋玻片
蓋玻片厚度在o.17mm左右,光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光,也可用干涉蓋玻片,這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過(guò),而反射激發(fā)光,這種反射的激發(fā)光又可激發(fā)標(biāo)本。

標(biāo)本
組織切片或其他標(biāo)本不能太厚,如太厚激發(fā)光大部消耗在標(biāo)本下部,而物鏡直接觀察到的上部不能充分激發(fā)。另外,細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋、背景非特異染色引起的熒光影響判斷。

鏡油
一般暗視野熒光顯微鏡和油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須使用鏡油,使用特制的無(wú)熒光鏡油,也可用甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對(duì)圖像質(zhì)量略有影響

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