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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 人胰腺星狀細(xì)胞
規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 胰腺組織 |
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貨號 | CS-X2781 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:人胰腺星狀細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 人胰腺星狀細(xì)胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫、yi蛋白酶原、脂肪酶、淀粉等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌生長抑,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細(xì)胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞,PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達(dá)Desmin蛋白,活化后的PSC則表達(dá)α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達(dá)Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達(dá)alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn),原代分離的細(xì)胞培養(yǎng)6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,細(xì)胞接種24h仍然表達(dá)Desmin,48h后Desmin基本不再表達(dá)。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細(xì)胞開始表達(dá)alpha-SMA,隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞表達(dá)alpha-SMA,而不再表達(dá)Desmin,說明細(xì)胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細(xì)胞激活,傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型,目前研究發(fā)現(xiàn):胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化,導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的人胰腺星狀細(xì)胞采用膠原酶制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實驗室分離的人胰腺星狀細(xì)胞經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài) 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X2781 | 組織來源 | 胰腺組織 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài) | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
細(xì)胞保存方法:
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 | 人鎂依賴性磷suanmei1(MDP1)檢測試劑盒 |
大鼠椎間盤髓核細(xì)胞 | 人鈣腔蛋白(CALU)檢測試劑盒 |
雞肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 人可溶性前體蛋白α(sAPPα)試劑盒ELISA |
雞外周血淋巴細(xì)胞 | 雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)試劑盒 ELISA |
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 傳染性軟疣病毒PCR試劑盒 |
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞 | 霍亂弧菌O1型PCR試劑盒 |
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 | 太米阿米病毒PCR檢測試劑盒 |
人骨髓單核細(xì)胞 | 綿羊星狀病毒通用PCR檢測試劑盒 |
人滑膜細(xì)胞 | 滑液支原體PCR試劑盒 |
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 | 蛇源性成分PCR試劑盒 |
人卵巢上皮細(xì)胞 | 松鼠猴皰疹病毒PCR試劑盒 |
人皮膚癌組織源細(xì)胞 | 黃熱病病毒PCR檢測試劑盒 |
人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞 | 人胰腺星狀細(xì)胞化膿性鏈球菌PCR試劑盒 |
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞 | 四輻射鳥圓線蟲PCR試劑盒 |
人前脂肪細(xì)胞 | 蒼白密螺旋體梅毒螺旋體PCR檢測試劑盒 |
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