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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 人腎動脈內(nèi)皮細胞
規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 腎組織 |
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貨號 | CS-X2939 | 細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X2939 | 組織來源 | 腎組織 |
傳代特性 | 可傳2-3代 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:人腎動脈內(nèi)皮細胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 人腎動脈內(nèi)皮細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳suan氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維sheng素d3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內(nèi),上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細血管,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,進入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng),再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,最后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管,又是腎的機能血管,與腎泌尿機能密切相關(guān)。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細血管網(wǎng):腎小球毛細血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動脈內(nèi)皮細胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈內(nèi)皮細胞主要功能有:①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用,②在腎小管的重吸收過程中起重要作用,③保持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的人腎動脈內(nèi)皮細胞采用yi蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實驗室分離的人腎動脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣 傳代特性 可傳2-3代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì),應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人大隱靜脈內(nèi)皮細胞 | 人抗乳頭狀瘤病毒17型(HPV17)抗體(IgG)試劑盒ELISA |
大鼠視網(wǎng)膜前體細胞 | 人胱天蛋白mei12(Casp-12)試劑盒ELISA |
大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細胞 | 人抗SSA/Ro抗體 ELISA檢測試劑盒 |
大鼠小腸黏膜上皮細胞 | 人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)檢測試劑盒 |
大鼠心臟微血管周細胞 | 賈第蟲通用PCR試劑盒 |
大鼠牙胚細胞 | 香附染料法PCR鑒定試劑盒 |
大鼠胰島細胞 | 登革熱病毒ⅠⅡ型PCR檢測試劑盒 |
大鼠真皮微血管內(nèi)皮細胞 | 海德堡沙門氏菌PCR檢測試劑盒 |
大鼠主動脈平滑肌細胞 | 甲型流感()病毒N1亞型RT-PCR試劑盒 |
大鼠棕色前脂肪細胞 | 人腺病毒D64型PCR試劑盒 |
雞腎小管上皮細胞 | 沙門氏菌(SPP)核suan檢測試劑盒 |
人肺大動脈平滑肌細胞 | 解脲脲原體PCR檢測試劑盒 |
人表皮角質(zhì)形成細胞 | 人腎動脈內(nèi)皮細胞交鏈孢霉屬通用PCR檢測試劑盒 |
人肝動脈內(nèi)皮細胞 | 傘枝梨頭霉PCR檢測試劑盒 |
人骨骼肌細胞 | 副雞嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 |
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