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規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 膀胱組織 |
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貨號 | CS-X2931 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:大鼠膀胱成纖維細胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 大鼠膀胱成纖維細胞分離自膀胱組織;膀胱是一個儲尿器官,在哺乳類動物,它是由平滑肌組成的一個囊形結構,位于骨盆內,其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織)。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的膀胱成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近年來,堿性成纖維細胞生長因子在膀胱癌發(fā)病過程中的作用、與生物學行為之間的關系以及治療上的應用已受到重視。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的大鼠膀胱成纖維細胞采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的大鼠膀胱成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài) 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X2931 | 組織來源 | 膀胱組織 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內狀態(tài) | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠軟骨細胞 | 人抗蘇氨?;?/span>tRNA合成mei,細胞質(TARS)抗體ELISA檢測試劑盒 |
人源NK細胞 | 人磷suan化乙酰(PaCoA)檢測試劑盒 |
人直腸平滑肌細胞 | 人抗β2糖蛋白I(β2-GPI)抗體(IgM)檢測試劑盒 |
人子宮內膜間質細胞 | 人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA檢測試劑盒 |
兔腹腔巨噬細胞 | 豬圓環(huán)病毒3型PCR試劑盒 |
兔肌腱成纖維細胞 | 續(xù)斷染料法PCR鑒定試劑盒 |
兔膀胱成纖維細胞 | 大豆內源基因PCR檢測試劑盒 |
兔視網(wǎng)膜色素上皮細胞 | 亞利桑那沙門氏菌PCR檢測試劑盒 |
兔脂肪間充質干細胞 | 甲型流感()病毒H7N4亞型RT-PCR試劑盒 |
小鼠背根神經(jīng)元細胞 | 人腺病毒D74型PCR試劑盒 |
小鼠腸巨噬細胞 | 沙門氏菌通用PCR檢測試劑盒 |
小鼠腹膜間皮細胞 | 杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒 |
小鼠多巴胺神經(jīng)元細胞 | 大鼠膀胱成纖維細胞假皮疽組織胞漿菌PCR試劑盒 |
小鼠肝星狀細胞 | 沙門氏菌invA 基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法) |
小鼠骨髓間充質干細胞 | 非洲馬瘟病毒PCR檢測試劑盒 |
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