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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	腎組織
貨號(hào)	CS-X2952	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號(hào)	CS-X2952	組織來源	腎組織
傳代特性	可傳1-2代	培養(yǎng)基	含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	生長(zhǎng)特性	貼壁
培養(yǎng)條件		換液頻率	每2-3天換液一次

人腎足突細(xì)胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：人腎足突細(xì)胞
2.組織來源：腎組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人腎足突細(xì)胞分離自腎組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動(dòng)脈。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細(xì)胞（podocyte）即腎小囊臟層上皮細(xì)胞，它附著于腎小球基底膜（GBM）的外側(cè)，連同GBM和毛細(xì)血管內(nèi)皮一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障。足細(xì)胞特殊的解剖位置，使得其體內(nèi)研究較為困難；又由于正常成年機(jī)體的腎臟足細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞，體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞不能增殖。足細(xì)胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突（FP），呈指狀交叉復(fù)蓋于GBM外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細(xì)胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分，IV型膠原和纖維連接蛋白（FN）；在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）和組織蛋白酶，從而在GBM的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。足細(xì)胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30-40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜，即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統(tǒng)的最后屏障，對(duì)于維持腎小球?yàn)V過屏障結(jié)構(gòu)與功能完整性發(fā)揮關(guān)鍵作用。

5.方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎足突細(xì)胞采用機(jī)械研磨過不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩結(jié)合膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎足突細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

人腎足突細(xì)胞

注意事項(xiàng)：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長(zhǎng)期凍存無，而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞	人抗meiⅢ抗體檢測(cè)試劑盒
小鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞	人周期su依賴性激mei5(CDK5)ELISA檢測(cè)試劑盒
小鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞	人卷曲螺旋, 肌球蛋白樣BCL2 結(jié)合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)檢測(cè)試劑盒
小鼠胚肺成纖維細(xì)胞	人Ⅲ型膠原蛋白(COL Ⅲ)檢測(cè)試劑盒
小鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞	幼蟲芽孢桿菌PCR試劑盒
小鼠乳腺成纖維細(xì)胞	五倍子染料法PCR鑒定試劑盒
小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞	鵝特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒
小鼠腎小球系膜細(xì)胞	白蛉熱西西里病毒PCR檢測(cè)試劑盒
小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞	甲型流感病毒通用探針法法熒光定量RT-PCR試劑盒
小鼠外周血中性粒細(xì)胞	人腺病毒D46型PCR試劑盒
小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞	三代蟲PCR試劑盒
小鼠羊膜間質(zhì)細(xì)胞	萬古霉su耐藥基因PCR測(cè)定試劑盒
小鼠胸腺上皮細(xì)胞	人腎足突細(xì)胞杰米斯頓病毒PCR檢測(cè)試劑盒
小鼠真皮成纖維細(xì)胞	塞皮克病毒PCR檢測(cè)試劑盒
小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞	(E/NL)PCR檢測(cè)試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動(dòng)試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。