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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 人肝星狀細胞
規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 肝臟組織 |
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貨號 | CS-X2864 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X2864 | 組織來源 | 肝臟組織 |
傳代特性 | 可傳3代左右 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:人肝星狀細胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 人肝星形細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞(HSC)又名肝貯脂細胞、貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等,是肝臟細胞外基質(zhì)的主要來源。HSC在激活后可進一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞樣細胞,各種可導致肝纖維化的因素均將HSC作為最終靶細胞。正常情況下,HSC處于靜止狀態(tài),當肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機械刺激等損傷時,HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚?,激活的HSC可通過增生和分泌細胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建,此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi),是合成、分泌細胞外基質(zhì)的主要來源,在肝纖維化的發(fā)生中處于最重要地位。肝星形細胞是肝臟的間充質(zhì)細胞,約占肝臟細胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質(zhì)的主要細胞群,肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質(zhì)成分,合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu),還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外,肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的人肝星形細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實驗室分離的人肝星狀細胞經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳3代左右 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠腎動脈平滑肌細胞 | 人賴氨suan特異性脫甲基mei5A(JARID1A)檢測試劑盒 |
293H (人胚腎細胞) | 人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒elisa |
4T1 (小鼠乳腺癌細胞) | 人抗內(nèi)因子抗體(IgG)檢測試劑盒 |
A2058 (人皮膚癌細胞) | 雞轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)試劑盒ELISA |
AAV-293 (人胚腎細胞) | 哈扎拉病毒RT-PCR試劑盒 |
AN3 CA (人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) | 沙眼衣原體PCR試劑盒 |
B16-F10 (小鼠皮膚黑色素瘤細胞) | 河流弧菌PCR檢測試劑盒 |
Bcap-37 (人乳腺癌細胞) | 黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒 |
BGC-823 (人胃腺癌細胞(低分化)) | 雞血藤探針法PCR鑒定試劑盒 |
BT-474 [BT474] (人乳腺導管癌細胞) | 肉毒梭狀芽孢桿菌G型外毒su基因PCR試劑盒 |
C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細胞) | 嗜熱鏈球菌PCR檢測試劑盒 |
CCD-18Co (人結(jié)腸組織細胞) | 擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測試劑盒 |
Caki-2 (人乳頭狀腎細胞癌細胞) | 人肝星狀細胞雞源性成分PCR試劑盒 |
CNE (人鼻咽癌細胞) | 嗜肺軍團菌PCR檢測試劑盒 |
CRT (人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞) | 小腸結(jié)腸炎耶爾森菌PCR檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。
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