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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學試劑>>生化測試劑盒>> 堿性磷酸酶檢測試劑盒
貨號 | CS-C7693 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 100次 | 英文名稱 | Alkaline Phosphatase Assay Kit |
用途 | 僅供科研研究實驗 |
堿性磷酸酶檢測試劑盒檢測緩沖液———————————15ml
顯色底物————————————2管
p-nitrophenol溶液(10mM)—————0.1ml
反應終止液———————————12ml
堿性磷酸酶也稱堿性磷酸酯酶,可以在堿性條件下催化磷酸酯鍵的水解。哺乳動物中,肝臟、膽管、腎臟、骨頭和胎盤中的堿性磷酸酶活性比較高。常見的堿性磷酸酶包括腸道堿性磷酸酶、非組織特異性堿性磷酸酶和胎盤堿性磷酸酶。常見的小牛腸堿性磷酸酶被廣泛用于二抗等的標記最終用于蛋白和核酸等的檢測,也常用于DNA或RNA 5'和3'末端的去磷酸化(去單磷酸化),特別是質(zhì)粒的5'末端去磷酸化以避免質(zhì)粒自連等。
干細胞,如iPS中,堿性磷酸酶的活性很高,常被用作iPS成功誘導的標志。另外,分化的結(jié)腸癌細胞中堿性磷酸酶的活性也會顯著升高,被當作結(jié)腸癌細胞分化程度定性和定量的指標。此外,血清中堿性磷酸酯酶的升高,被稱作高堿性磷酸酶血癥,被認為和惡性膽管阻塞、原發(fā)性膽管硬化、原發(fā)性硬化膽管炎、肝淋巴瘤和肝肉瘤等肝膽疾病密切相關。血清中堿性磷酸酶活性升高還和骨頭生成密切相關,因為堿性磷酸酶是成骨細胞的副產(chǎn)物。血清中堿性磷酸酶活性過低也和一些疾病相關。兒童和孕婦血清中的堿性磷酸酶活性較普通人高一些。血清中堿性磷酸酶活性范圍在20-140U/L。除胎盤堿性磷酸酶以外,其它的內(nèi)源性堿性磷酸酶加熱后易失活。
Para-nitrophenyl phosphate是一種常用的磷酸酶顯色底物,在堿性條件下,可在堿性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol在堿性條件下,呈黃色產(chǎn)物,可以在400-415nm檢測吸光度。產(chǎn)物黃色越深, 說明堿性磷酸酶檢活性越高,反之則酶活性越低。據(jù)此通過比色分析就可以計算出堿性磷酸酶活性水平。
注意事項:
1. 如果希望進行酶活性的絕對定量,進行酶反應時必須注意精確計時。此時推薦采用孵育30分鐘等較長的時間,以減小操作過程中的時間誤差。同時如果樣品中酶活性較高,則可以預先適當稀釋樣品。
2. 樣品溶液中須避免出現(xiàn)EDTA、氟離子、檸檬酸鹽等堿性磷酸酶的抑制劑。
3. 檢測緩沖液和p-nitrophenol溶液對人體有害,請注意適當防護。反應終止液有腐蝕性,請小心操作。
儲存條件:-20℃,有效期一年。
產(chǎn)品名稱 | 堿性磷酸酶檢測試劑盒 | 貨號 | CS-C7693 |
英文名稱 | Alkaline Phosphatase Assay Kit | 規(guī)格 | 100次 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
細胞生物學研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細胞化學分析技術(shù).
3.細胞工程:細胞培養(yǎng)。
注意事項:
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當分裝保存。反復凍融過程中,可能會導致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法,實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
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