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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學試劑>>免疫檢測>> 檸檬酸鈉-EDTA抗原修復液(40×)免疫檢測
貨號 | CS-C8815 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 125ml | 英文名稱 | Antigen Retrieval Buffer (40×Citrate-EDTA, pH 6.2) |
用途 | 僅供科研研究實驗 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
細胞生物學研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細胞化學分析技術(shù).
3.細胞工程:細胞培養(yǎng)。
檸檬酸鈉-EDTA抗原修復液(40×)免疫檢測抗原修復的方法非常多,主要有熱誘導的抗原修復(Heat Induced Epitope Retrieval,HIER)和酶誘導的抗原修復(Proteolytic Induced Epitope Retrieval),修復方法的選擇需要考慮到抗原表達程度、抗體要求、組織類型以及組織固定方法等因素。作為免疫染色至關(guān)重要的一步,抗原修復方法的選擇、溫度、pH值、修復時間、修復介質(zhì)都會影響到實驗結(jié)果。實驗者需根據(jù)自身的實驗體系以及實驗條件來選擇恰當?shù)男迯腿芤?,從而達到佳的修復效果。
本品為檸檬酸鈉-EDTA抗原修復緩沖液,pH 6.2,采用了常用的檸檬酸鈉緩沖液和EDTA,結(jié)合了兩者修復抗原的優(yōu)點,并經(jīng)過適當優(yōu)化,可以更加有效去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。本品可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。
本品為40×濃縮的檸檬酸鈉-EDTA抗原修復液,使用前需用ddH2O稀釋成1×工作液。
注意事項
1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2)抗原修復通常用于醛類固定的石蠟切片,而冰凍切片由于組織比較脆弱,易在修復過程中被破壞掉,因此比較少進行抗原修復。然而醛類固定的冰凍切片同樣會發(fā)生蛋白交聯(lián)而封閉抗原表位,導致染色效果不佳。很多文獻資料表明采用適當?shù)姆椒ㄟM行冰凍切片抗原修復,也能顯著改善染色效果。特別是當染色效果欠佳的前提下,可考慮進行冰凍切片的抗原修復。
3)本產(chǎn)品經(jīng)凍存后需經(jīng)適當加熱后才能溶解。同時由于本產(chǎn)品含有少量的特殊去垢劑,加熱后會產(chǎn)生非常細密的氣泡而呈現(xiàn)非常均勻的類似渾濁狀,屬于正常現(xiàn)象,并非不溶解或產(chǎn)生了沉淀。室溫放置較長時間后,例如1-2天,溶液會澄清。對于溶解后呈現(xiàn)非常均勻的類似渾濁狀的本產(chǎn)品,此時即可取適量稀釋后使用。抗原修復過程中加熱時也會產(chǎn)生非常細密的氣泡而呈現(xiàn)均勻的渾濁狀,也屬于正?,F(xiàn)象,請放心使用。
4)修復過程中一定要使用足量的修復液(1×)來浸沒組織切片。
儲存條件:4℃,有效期一年。
產(chǎn)品名稱 | 檸檬酸鈉-EDTA抗原修復液(40×)免疫檢測 | 貨號 | CS-C8815 |
英文名稱 | Antigen Retrieval Buffer (40×Citrate-EDTA, pH 6.2) | 規(guī)格 | 125ml |
免疫染色實驗,細胞或組織往往需要經(jīng)多醛、甲醛或其他醛類固定來維持本身的形態(tài)結(jié)構(gòu),然而此步操作通常會封閉抗原決定簇,使得相當多的抗原不能與抗體很好的進行反應,從而引起染色信號衰減,甚至出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象。引起抗原決定簇被掩蓋的原因在于:1)醛類固定劑導致組織上的許多氨基酸殘基在分子內(nèi)或分子間形成醛鍵,從而封閉抗原表位;2)醛類固定劑在固定過程中與蛋白質(zhì)發(fā)生交聯(lián)(cross-link),形成醛交聯(lián)蛋白,導致抗原表位被封閉。因此,需要對固定組織進行抗原修復(antigen retrieval,AR)來逆轉(zhuǎn)被掩蓋的抗原表位,使其重新暴露出來,恢復抗原表位-抗體的結(jié)合能力,從而改善染色效果。
注意事項:
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當分裝保存。反復凍融過程中,可能會導致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法,實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
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