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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>免疫檢測>> Western一抗二抗清除劑(弱堿性)免疫檢測
貨號 | CS-C8754 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 250ml | 英文名稱 | Antibody Stripping buffer(Weakly alkaline) |
用途 | 僅供科研研究實驗 |
Western一抗二抗清除劑(弱堿性)免疫檢測使用Western一抗二抗去除液多次重復(fù)使用同一張膜,會導(dǎo)致蛋白信號的減弱。但是,本W(wǎng)estern一抗二抗去除液,經(jīng)過多個抗體的檢測試驗,通??梢灾貜?fù)利用膜3-5次。使用本試劑只需大約20-30分鐘即可實現(xiàn)蛋白膜的重復(fù)使用,然后可以進行封閉等后續(xù)的Western操作。
不同的Western一抗二抗去除液主要在去除結(jié)合的一抗二抗的原理方面略有不同。分別依靠去垢劑、酸性、堿性、還原劑、螯合劑、鹽濃度以及一些特殊試劑等的不同組合來解除一抗二抗的結(jié)合,同時又不會導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失。
用于普通的Western檢測時蛋白膜上一抗二抗的去除可以任選一種去除液。如果是NC膜,即硝酸纖維素膜時,不宜選用YT071N。從時間角度考慮,強堿性、弱堿性和中性的去除液所需的時間都比較短,可以優(yōu)先考慮。從價格因素考慮,強堿性的去除液性價比高。從安全性考慮,中性的去除液由于沒有腐蝕性而表現(xiàn)出更高的安全性。弱堿性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正確操作,并進行適當防護,使用強堿性的一抗二抗去除液也是可行的。
對于特定的抗原和抗體,很難說哪一種Western一抗二抗去除液的效果好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳時,可以考慮適當延長一抗二抗去除液的孵育時間,同時確保孵育時的溫度不低于20℃。溫度過低時一抗二抗的去除效果會下降。同時也可以考慮嘗試其它的一抗二抗去除液,以摸索出佳的適合您實驗條件的Western一抗二抗去除液。
注意事項:
1. 使用辣根過氧化物酶(HRP),任何一次封閉(blocking)都應(yīng)當使用5%脫脂牛奶,如果使用堿性磷酸酯酶,任何一次封閉都應(yīng)當使用酪蛋白(casein)。
2. 為取得佳效果,推薦使用PVDF膜。但硝酸纖維素膜也可以使用本W(wǎng)estern一抗二抗去除液。
3. 使用化學(xué)發(fā)光試劑進行的Western檢測適用本試劑。使用非化學(xué)發(fā)光試劑進行的Western檢測, 例如DAB,NBT/BCIP,不適用于本試劑。
4. 本W(wǎng)estern一抗二抗去除液有輕微腐蝕性,使用時請注意防護。
儲存條件:4℃,有效期一年。
產(chǎn)品名稱 | Western一抗二抗清除劑(弱堿性)免疫檢測 | 貨號 | CS-C8754 |
英文名稱 | Antibody Stripping buffer(Weakly alkaline) | 規(guī)格 | 250ml |
本品用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測后,有時還需要檢測tubulin、actin等表達量相對穩(wěn)定的蛋白作為參照,或檢測其它蛋白進行比較。通過使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用過的膜檢測其它蛋白。和重新跑一個SDS-PAGE膠相比,不僅省時省力,而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強。
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
細胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細胞工程:細胞培養(yǎng)。
注意事項:
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,反復(fù)凍融會導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當分裝保存。反復(fù)凍融過程中,可能會導(dǎo)致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法,實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Akt廣譜抑制劑 | Anoctamin2蛋白ELISA試劑盒 |
彗星電泳法檢測細胞損傷試劑盒 | CopineⅧ蛋白ELISA試劑盒 |
Caspase-3抑制劑Ac-DEVD-CHO | 土壤硅鋁率活性比色法檢測試劑盒 |
SRB細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 | 土壤脲(SUE)活性比色法檢測試劑盒 |
MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒 | 互生蛋白α1ELISA試劑盒 |
0.1M 硼緩沖液,pH8.4 | 肌球蛋白ⅦAELISA試劑盒 |
細胞活力(活死細胞染色)檢測試劑盒(Calcein AM,PI法,適用于FACS、FM) | 雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 |
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-Alexa Fluor 647/PI) | 人抑制su(INH)試劑盒elisa |
廣譜Caspase抑制劑(Z-VAD-FMK)(20mM) | 人載脂蛋白L1(APOL1)試劑盒ELISA |
臺盼藍 | 大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒 |
Bcl-2抑制劑(GDC-0199) | 丙型肝炎病毒1型RT-PCR試劑盒 |
細胞凋亡檢測試劑盒IV(FITC+POD) | 人免疫缺陷病毒1型M群G型RT-PCR試劑盒 |
鈣熒光探針(Fluo 3-AM) | 東方蜜蜂微孢子蟲PCR檢測試劑盒 |
ANNEXIN V- FITC/PI凋亡檢測試劑盒 | 致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒 |
Hoechst33342染色試劑盒 | 火雞出血性腸炎病毒PCR試劑盒 |
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