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更新時(shí)間:2024-07-25 13:54:24瀏覽次數(shù):586次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 肺動(dòng)脈組織 |
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貨號(hào) | CS-X2732 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
產(chǎn)品信息:
貨號(hào) | CS-X2732 | 組織來源 | 肺動(dòng)脈組織 |
傳代特性 | 可傳2-3代 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺大動(dòng)脈組織;肺大動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺大動(dòng)脈起于右心室,在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈,經(jīng)肺門入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室,在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行,至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長而粗,經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布;該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。 5.方法簡介: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用yi蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性 可傳2-3代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞保存方法:
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;
8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項(xiàng):
1)、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無,而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔乳腺上皮細(xì)胞 | 人凝溶膠蛋白(Gelsolin)檢測試劑盒 |
人心臟纖維原細(xì)胞 | 人睪酮(T)檢測試劑盒 |
人胰腺星狀細(xì)胞 | 人磷脂meiD2(PLD2)試劑盒ELISA |
人直腸黏膜上皮細(xì)胞 | 雞γ干擾su(IFN-γ) 試劑盒 ELISA |
人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞 | 匙狀毛樣線蟲PCR試劑盒 |
兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 甲型流感()病毒H7N7亞型RT-PCR試劑盒 |
兔滑膜細(xì)胞 | 溶血葡萄球菌PCR檢測試劑盒 |
兔尿道平滑肌細(xì)胞 | 肝胰腺壞死性PCR檢測試劑盒 |
兔軟骨細(xì)胞 | 核桃仁探針法PCR鑒定試劑盒 |
兔脂肪干細(xì)胞 | 嗜吞噬細(xì)胞無漿體(無形體)PCR試劑盒 |
小鼠NG2細(xì)胞 | 跳躍病病毒PCR檢測試劑盒 |
小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞 | 紅色毛癬菌PCR檢測試劑盒 |
小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞河流弧菌PCR試劑盒 |
小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞 | 田鼠分枝桿菌PCR試劑盒 |
小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞 | 豬鏈球菌通用PCR檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
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