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規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 視網膜組織 |
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貨號 | CS-X3054 | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
商品介紹:
產品名稱:小鼠視網膜色素上皮細胞 3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠視網膜色素上皮細胞分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節(jié)細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強。視網膜色素上皮(RPE)位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質和代謝終產物轉運通道;主要是由單層色素上皮細胞所構成,排列十分規(guī)則。視網膜色素上皮參與shi黃醇循環(huán),吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形,細胞分為三部分,即頂部、體部和基底部。視網膜色素上皮細胞無再生能力,細胞死亡后不被替換,而是鄰近的細胞向側面滑動,以死亡細胞遺留下來的空間。視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節(jié)之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與shi黃醇循環(huán),吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮細胞采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 上皮細胞樣 傳代特性 可傳1-2代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
產品信息:
貨號 | CS-X3054 | 組織來源 | 視網膜組織 |
傳代特性 | 可傳1-2代 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細胞處于指數生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
公司正在出售的產品:
大鼠心臟微血管內皮細胞 | 人相關抗原7(SPAG7)ELISA檢測試劑盒 |
小鼠脈絡膜血管內皮細胞 | 人組織蛋白meiD(cath-D)檢測試劑盒 |
小鼠尿道上皮細胞 | 人核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)檢測試劑盒 |
小鼠脾淋巴細胞 | 人c-jun 檢測試劑盒 |
小鼠前列腺平滑肌細胞 | 戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒 |
小鼠神經干細胞 | 靈芝染料法PCR鑒定試劑盒 |
小鼠腎實質細胞 | 貓弓形蟲PCR檢測試劑盒 |
小鼠視網膜Muller細胞 | 跗線螨屬通用PCR檢測試劑盒 |
小鼠外周血單核細胞 | 柯拉松血吸蟲PCR試劑盒 |
小鼠小腸Cajal間質細胞 | 人免疫缺陷病毒1型M群G型RT-PCR試劑盒 |
小鼠心臟微血管內皮細胞 | 人葡萄球菌PCR檢測試劑盒 |
小鼠胰腺上皮細胞 | 庫蚊通用PCR試劑盒 |
小鼠牙乳頭細胞 | 小鼠視網膜色素上皮細胞口蹄疫病毒O型(FMDV-O)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
小鼠脂肪干細胞 | 人免疫缺陷病毒型群PCR檢測試劑盒 |
小鼠子宮成纖維細胞 | 牛呼吸道合胞病毒PCR檢測試劑盒 |
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