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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 大鼠腓腸肌細(xì)胞
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更新時(shí)間:2024-07-26 16:17:12瀏覽次數(shù):241次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 骨骼肌組織 |
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貨號(hào) | CS-X3427 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
產(chǎn)品信息:
貨號(hào) | CS-X3427 | 組織來源 | 骨骼肌組織 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài) | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:大鼠腓腸肌細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 大鼠腓腸肌細(xì)胞分離自小腿肌肉組織;腓腸肌位于小腿后面的皮下,是一個(gè)淺表的肌肉,當(dāng)人體站立時(shí),可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌。腓腸肌為小腿后側(cè)群淺組肌肉,有內(nèi)、外二頭,內(nèi)側(cè)頭起自股骨內(nèi)側(cè)髁上的三角形隆起,外側(cè)頭起自股骨外側(cè)髁的近側(cè)端,在二頭的深面各有一滑膜囊。腓腸肌的二肌腹增大,在腘窩下角彼此鄰近,所成夾角多為25°~30°,此肌下行與比目魚肌移行為跟腱,止于跟骨結(jié)節(jié)。腓腸肌的動(dòng)脈發(fā)自腘動(dòng)脈、靜脈與動(dòng)脈伴行,注入腘靜脈或小隱靜脈。腓腸肌的神經(jīng)全部來自脛神經(jīng)。包括內(nèi)、外側(cè)肌神經(jīng)。腓腸肌在行走及站立時(shí)能提足跟向上,直立時(shí),腓腸肌和比目魚肌都參加強(qiáng)固膝關(guān)節(jié),并調(diào)節(jié)小腿和足的位置。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕,可以切取腓腸肌內(nèi)側(cè)頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉(zhuǎn)。腓腸肌還可影響足的縱弓,該肌癱瘓時(shí),足縱弓將加深。該肌由脛神經(jīng)支配,股骨髁上骨折時(shí),因腓腸肌收縮遠(yuǎn)側(cè)端常自后移位。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉。腓腸肌細(xì)胞屬于骨骼肌細(xì)胞的一種,骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段,叫做一個(gè)肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。 5.方法簡介: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腓腸肌細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腓腸肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml) 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞保存方法:
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;
8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項(xiàng):
1)、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無,而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
AM (人腺樣囊性癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移)) | 人臂板蛋白4C(Sema 4C)檢測(cè)試劑盒 |
小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞 | 人補(bǔ)體片段3c(C3c)檢測(cè)試劑盒 |
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 | 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)試劑盒ELISA |
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 | 人白介su1受體拮抗劑(IL1Ra)檢測(cè)試劑盒 |
小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 沙雷菌通用PCR試劑盒 |
小鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞 | 馬皰疹病毒4型PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞 | 豬傳染性胃腸炎/豬流行性腹瀉病毒(TGEV/PEDV)核suan檢測(cè)試劑盒 |
小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 | 病毒H7亞型PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠外周血白細(xì)胞 | 綿羊源性成分PCR試劑盒 |
小鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞 | 牛皰疹乳頭炎病毒PCR試劑盒 |
小鼠外周血單核細(xì)胞 | 牛免疫缺損病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠外周血淋巴細(xì)胞 | 木霉屬通用PCR試劑盒 |
小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 | 大鼠腓腸肌細(xì)胞莫拉氏菌屬通用PCR試劑盒 |
小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞) | 牛莫拉氏菌PCR試劑盒 |
小鼠外周血中性粒細(xì)胞 | A+C群腦膜炎奈瑟菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
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