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人血管生成素1（ANG-1）ELISA酶免試劑盒

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所  在  地上海

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更新時(shí)間：2017-08-22 06:19:45瀏覽次數(shù)：310次

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經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：88條

所在地區(qū)：上海上海

聯(lián)系人：楊經(jīng)理

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

提供人血管生成素1(ANG-1)ELISA酶免試劑盒，Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA酶免試劑盒，您可以選擇進(jìn)口原裝96T和進(jìn)口分裝48T和96T elisa酶免試劑盒。48T可以檢測(cè)46個(gè)標(biāo)本，96T可以檢測(cè)92個(gè)標(biāo)本并提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。同時(shí)為您提供細(xì)胞凋亡檢測(cè)， 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)， 免疫學(xué)及分子生物學(xué)試劑
細(xì)胞因子等數(shù)萬(wàn)種試劑。

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱：人血管生成素1（ANG-1）ELISA酶免試劑盒
英文名稱：Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA酶免試劑盒
規(guī)格：48T/96T
檢測(cè)標(biāo)本：用于ELISA測(cè)定的臨床標(biāo)本zui為常用的是血清（漿），有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測(cè)目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。

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，Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA酶免試劑盒 專業(yè)供應(yīng)。


相關(guān)知識(shí)：
ELISA設(shè)計(jì)：ELISA測(cè)定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)主要涉及到抗體或抗原的使用濃度、溫育溫度、溫育時(shí)間、測(cè)定模式是采用競(jìng)爭(zhēng)抑制或雙夾心直接測(cè)定，以及雙夾心測(cè)定是采用一步還是兩步法等，其對(duì)測(cè)定的影響主要是試驗(yàn)的測(cè)定下限、特異性和簡(jiǎn)便性等。
試劑準(zhǔn)備
1、使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫（18-25 ），試劑不能直接在37 溶解。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液稀釋至1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為4,000 pg/mL（貯液）。先將其稀釋為
2,000 pg/mL（標(biāo)準(zhǔn)曲線zui高濃度）后，再準(zhǔn)備7 個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP 管，每個(gè)EP 管中加入500 的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成2,000 pg/mL，1,000 pg/mL，500 pg/mL，250 pg/mL，125 pg/mL，62.5 pg/mL，31.2 pg/mL，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（0pg/mL）直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。Tube 1 2 3 4 5 6 7 8 9pg/mL 4,000 2,000 1,000 500 250 125 62.5 31.2 0
3、標(biāo)本：血清或血漿標(biāo)本*稀釋大約10-100倍，標(biāo)本使用0.02 M 的PBS 稀釋（ PH=7.0-7.2）。
4、檢測(cè)稀釋液A 及檢測(cè)稀釋液B：用6mL 蒸餾水或去離子水將6mL 濃檢測(cè)液A 及B稀釋至12mL，進(jìn)行2 倍稀釋，稀釋后的工作液不宜進(jìn)行冷凍保存。
5、檢測(cè)溶液A 及檢測(cè)溶液B：Detection A 及Detection B 在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。臨用前分別以檢測(cè)稀釋液A或B 1:100稀釋（如：10 檢測(cè)溶液A / 990 檢測(cè)稀釋液A），充分混勻，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（100 /孔），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2mL。
6、濃洗滌液：用580mL 蒸餾水或去離子水將20mL 濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30稀釋。
7、底物溶液：請(qǐng)用滅菌的移液器吸頭吸取所需體積的TMB 至另一干凈容器中使用，容器中剩余的底物應(yīng)予丟棄，不要倒回TMB 瓶中。
注意：
1、標(biāo)準(zhǔn)品請(qǐng)于臨用前15 分鐘內(nèi)配制。該標(biāo)準(zhǔn)品只能使用一次。
2、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋不能直接在板中進(jìn)行。
3、標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A 工作液、檢測(cè)溶液B 工作液請(qǐng)使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆?；靹驎r(shí)要輕輕充分混勻，避免起泡。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確請(qǐng)使用微量吸管，并校準(zhǔn)微量加液器。請(qǐng)依據(jù)所需的量精確配制，盡量不要微量配制（如吸取檢測(cè)溶液A時(shí)，一次不要小于10 ），以避免造成濃度誤差。
4、請(qǐng)勿重復(fù)使用已經(jīng)稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A 工作液和檢測(cè)溶液B 工作液。
5、濃洗滌液中如有結(jié)晶析出，請(qǐng)先溫育至室溫，輕輕混勻，至到結(jié)晶*溶解再進(jìn)行配制。
操作步驟
實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋，使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1、加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔、空白孔。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔7 孔，依次加入100 不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品（見試劑準(zhǔn)備2）?？瞻卓准?00 （見試劑準(zhǔn)備第二步zui后一管），余孔加待測(cè)樣品100 ，酶標(biāo)板加上覆膜，37 溫育2 小時(shí)。
2、棄去液體，甩干，不用洗滌。
3、每孔加檢測(cè)溶液A 工作液100 （臨用前配制），酶標(biāo)板加上覆膜，37 溫育1 小時(shí)。
4、棄去孔內(nèi)液體，每孔用350 的洗滌液洗滌，浸泡1-2 分鐘，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干），重復(fù)洗板3 次。zui后一次洗滌后，要把孔內(nèi)的洗滌液*甩干。
5、每孔加檢測(cè)溶液B 工作液（臨用前配制）100 ，加上覆膜，37 溫育30 分鐘。
6、棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5 次，方法同步驟4。
7、每孔加底物溶液90 ，酶標(biāo)板加上覆膜，37 避光顯色（反應(yīng)時(shí)間控制在15-25 分鐘，不要超過(guò)30 分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4 孔梯度不明顯時(shí)，即可終止）。
8、每孔加終止溶液50 ，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物溶液的加入順序相同。如出現(xiàn)顏色不勻一，請(qǐng)輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板以使溶液混合均勻。
9、在確保酶標(biāo)板底無(wú)水滴及孔內(nèi)無(wú)氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度（ 值）。
注


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