W-TMB顯色試劑盒
英文名:W-TMB
相關(guān)類別:Western Blot
儲存:常溫下運輸,收到后,將所有溶液2-8℃情況下保存,保質(zhì)期為兩年。
規(guī)格:5次一盒
品牌:子科生物ZIKER
W-TMB顯色試劑盒概述:TMB全稱為3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺,為無色物質(zhì),作為供氫體,在辣根過氧化物酶作用下被氧化,產(chǎn)生有藍(lán)色的產(chǎn)物,在特殊試劑的作用下沉淀在膜或組織片上,主要吸收峰在370 nm和652 nm,比色方便,是HRP結(jié)合物zui常用的底物。在免疫組織化學(xué)、原位雜交、Western Blot、Southern Blot等膜顯色中應(yīng)用比較廣泛,也可以用于原位檢測細(xì)胞或組織內(nèi)源性的過氧化物酶。本試劑是為免疫組化、原位雜交、Western Blot等膜顯色專門配制的,能夠使用5次,適合的膜大小為6 × 8 cm。儲存條件:2~8°C。
組份:底物溶液 A;底物溶液 B;緩沖液 C
W-TMB顯色試劑盒操作步驟:
1. 在免疫印跡實驗中,先將相應(yīng)的HRP標(biāo)記的二抗覆蓋膜,37℃震蕩器上震蕩1-1.5 Hour,再用TBST或者PBST洗滌膜3~4
次,zui后一次用TBS或PBS洗滌膜,將膜轉(zhuǎn)移到陰暗處。
2. 顯色前先將膜浸泡在10 mL的緩沖液C中10 min,再加入0.5 mL左右的底物溶液A和4μL底物溶液B,充分混勻。
3. 在陰暗處,在37℃的情況下,反應(yīng)5-30 min,這時蘭色的產(chǎn)物條帶出現(xiàn)。
4. 照像記錄實驗結(jié)果。
注意事項:
1. 緩沖液C在使用前充分震蕩混勻。
2. 請在使用前按照上述比例配置所需溶液?,F(xiàn)配現(xiàn)用,如果有多余,當(dāng)顏色變藍(lán)時,應(yīng)該丟棄。
3. 請使用完后,將分析液A、分析液B和緩沖液C的蓋子旋緊,以防止溶液揮發(fā)和與空氣中的成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
4. 如果所使用的膜較大,請適當(dāng)增加所配試劑的量,以便*覆蓋膜。
5. 請正確配制western blot所需要的試劑,正確的膜轉(zhuǎn)移,抗體的稀釋和沖洗步驟,以保證能夠顯色和減少雜帶的產(chǎn)生。
6. 顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)10-30 min,再延長反應(yīng)時間,會使本底值增高,影響實驗結(jié)果的分析。
7. 本試劑只能夠用于體外實驗,不能夠用于臨床、治療和動物體內(nèi)實驗等目的,由此產(chǎn)生的后果概不承擔(dān)責(zé)任。
深圳子科生物精力打造高科技高品質(zhì)科研試劑產(chǎn)品,力爭成為的生化試劑供應(yīng)商,生產(chǎn)商之一,售前,售中,售后全程為您竭力服務(wù)。
其他產(chǎn)品:
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