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小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒

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更新時間:2020-05-12 16:54:49瀏覽次數(shù):522次

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小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒子科生物現(xiàn)貨供應,凡購買子科生物子科生物任何一款ELISA酶聯(lián)免疫分析檢測試劑盒,都可以享受免費代測服務,外地客戶可以由技術(shù)老師的指導下正確放置好樣本的保存方式后快遞郵寄到我公司技術(shù)部,本地客戶可以享受免費上門取樣服務!

小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒●規(guī)格: 96T/48T
●反應時間: 1-5h●所需樣本體積: 50-100ul●檢測波長: 450 nm
●用途: For research use only. Not for diagnostic use.●特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
●服務:子科生物所有的elisa試劑盒均可免費代測,全程Elisa實驗技術(shù)指導。●運輸:全國各地快遞免費送貨上門,低溫運輸,用冰袋加泡沫保溫盒包裝,確保產(chǎn)品運輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。

ELISA中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:
1、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
2、酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物);
3、酶的底物;
4、陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
5、結(jié)合物及標本的稀釋液;
6、洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。

小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒實驗測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2.將標準品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3.酶標板加上蓋,37℃反應 90 分鐘。 
4.反應后用自動洗板機吸去酶標板內(nèi)的液體;或甩去酶標板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5.將準備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應 60 分鐘。 
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。 
7.將準備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應 30 分鐘。 
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應 20-25 分鐘 (注意:顯色時間供參考,因用戶實驗室條件差異,顯色時間會有所不同。此時肉眼可 見標準品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色,后 3-4 孔差別不明顯)。 
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。 
11.用酶標儀在 450nm 測定 O.D.值。

樣品稀釋的一般原則 
用戶須估計樣品待測因子的含量,決定適當?shù)南♂尡稊?shù),以使稀釋后樣品中待測因子的濃度 處于 ELISA 試劑盒的檢測范圍。根據(jù)待測因子含量高、中、低的不同,分別采取不同的稀釋方案:
高:指待測因子在 20-200ng/ml。一般按 1:100 稀釋。297μ ι 樣品稀釋液加 3μ ι 樣品。 
中:指待測因子在 2-20ng/ml。一般按 1:10 稀釋。225μ ι 樣品稀釋液加 25μ ι 樣品。 
低:指待測因子在 31.2→2000pg/ml。按 1:2 稀釋。100μ ι 樣品稀釋液加 100μ ι 樣品。 
特低:指待測因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋,按每孔 100μ ι 樣品直接加入。

以上方案僅供參考,樣品的稀釋應有詳細記錄

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