●產(chǎn)品名稱：人乙醇脫氫酶（ADH）ELISA檢測(cè)試劑盒
●英文名稱：Human alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit
●貨號(hào)：ZK-H362
●規(guī)格： 96T/48T
●反應(yīng)時(shí)間： 1-5h
●所需樣本體積： 50-100ul
●檢測(cè)波長(zhǎng)： 450 nm
●用途： For research use only. Not for diagnostic use.
●特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
●服務(wù)：子科生物所有的elisa試劑盒均可免費(fèi)代測(cè)，全程Elisa實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)。
●運(yùn)輸：全國各地快遞免費(fèi)送貨上門，低溫運(yùn)輸，用冰袋加泡沫保溫盒包裝，確保產(chǎn)品運(yùn)輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。

人乙醇脫氫酶（ADH）ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟：
1．確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目，并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9；做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2．將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清，直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3．酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng) 90 分鐘。 
4．反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體；或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5．將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白顯色孔除 外）。37℃反應(yīng) 60 分鐘。 
6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次，每次浸泡 1 分鐘左右。 
7．將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白顯色孔除外）。37℃反應(yīng) 30 分鐘。 
8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次，每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液，37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 （注意：顯色時(shí)間供參考，因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異，顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色，后 3-4 孔差別不明顯）。 
10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。 
11．用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 O.D.值。

ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。  
下面分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法
1 、選擇試劑
選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 、加樣 
可能原因： 1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 、孵育 
可能原因： 1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。
解決辦法： 1) 貼封片或加蓋； 2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 、洗板 
可能原因： 1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 
解決辦法： 1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5 、顯色 
可能原因： 1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。
解決辦法： 1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 、終止 
可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 、讀板 
如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。深圳子科生物已經(jīng)用于9年的技術(shù)研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，能極大的保障每個(gè)消費(fèi)者的售后技術(shù)服務(wù)，讓您買的放心，用的放心！

ZK-H2295    人Ⅲ型膠原α1(COL3α1)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Collagen Type III Alpha 1 (COL3a1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2296    人基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2297    人半乳凝素12(GAL12)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Galectin 12 (GAL12) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2298    人半乳凝素1(GAL1)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Galectin 1 (GAL1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2299    人S100鈣結(jié)合蛋白(S100)ELISA檢測(cè)試劑盒    human S100 Calcium Binding Protein (S100) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2300    人角蛋白1(KRT1)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Keratin 1 (KRT1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2301    人胰島素降解酶(IDE)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Insulin Degrading Enzyme (IDE) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2302    人Lacritin蛋白(LACRT)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Lacritin (LACRT) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2303    人皮敵菌素(DCD)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Dermcidin (DCD) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2304    人半乳凝素14(GAL14)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Galectin 14 (GAL14) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2305    人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Transferrin Receptor (TFR) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2306    人趨化因子C-C-基元受體2(CCR2)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Chemokine C-C-Motif Receptor 2 (CCR2) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2307    人核因子κB受體激活因子(RANκ)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B (RANk) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2308    人極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Very Low Density Lipoprotein (VLDL) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2309    人氨乙酰丙酸δ脫水酶(ALAD)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Aminolevulinate Delta Dehydratase (ALAD) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2310    人70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Heat Shock 70kDa Protein 5 (HSPA5) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2311    人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子3(FGF3)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Fibroblast Growth Factor 3 (FGF3) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2312    人Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體C(MHCC)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Major Histocompatibility Complex Class I C (MHCC) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2313    人凸素1(PROM1)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Prominin 1 (PROM1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2314    人載脂蛋白B(APOB)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Apolipoprotein B (APOB) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2315    人破骨細(xì)胞關(guān)聯(lián)受體(OSCAR)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Osteoclast Associated Receptor (OSCAR) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2316    人CD24分子(CD24)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Cluster Of Differentiation 24 (CD24) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-H2317    人角化粒(CDSN)ELISA檢測(cè)試劑盒    human Corneodesmosin (CDSN) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物

?