豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP) ELISA試劑盒(KIT)檢測(cè)方法:雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、間接法測(cè)抗體、雙位點(diǎn)一步法、 競(jìng)爭(zhēng)法 、捕獲法、ABS-ELISA方法,我們子科生物主要采用雙抗體夾心法。詳細(xì)可以咨詢我們銷(xiāo)售人員。
產(chǎn)品名稱(chēng):豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP) ELISA試劑盒(KIT)
英文名稱(chēng):porcine Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP) ELISA Kit
貨號(hào):ZK-P6724
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豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP) ELISA試劑盒(KIT)實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟:
1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。
4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 OD值。
注意:客戶收到我公司產(chǎn)品請(qǐng)*時(shí)間確認(rèn)試劑盒是否有破損,酶標(biāo)板是否封閉,使用前 TMB顯色液應(yīng)為無(wú)色透明溶液,若發(fā)現(xiàn)顏色異常,或者其他問(wèn)題請(qǐng)及時(shí)與我司售后人員進(jìn)行,我們會(huì)*次安排進(jìn)行退換。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,底物請(qǐng)避光保存。使用之后所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,以免造成污染!
豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP) ELISA試劑盒(KIT)TallPrep™ Lysing Matrix C TallPrep™ 裂解介質(zhì)C 25x4.5 ml tubes
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