酵母選擇營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基之：
選擇性氨基酸混合物（Dropout Supplement, DO Supplement）
(單缺，雙缺，三缺，四缺)
背景描述：
酵母菌的質粒篩選通常基于營養(yǎng)缺陷型突變菌株的使用而開展，這些菌株在缺乏某種特定培養(yǎng)基組分（比如氨基酸，嘌呤或嘧啶）的情況下無法生長。當轉化含有突變基因的質粒后使得陽性轉化克隆能夠在缺乏必需營養(yǎng)組分的培養(yǎng)基內生長，正因如此，省卻成分培養(yǎng)基添加劑/選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）能用來篩選成功轉化的酵母培養(yǎng)物。
選擇性氨基酸混合物/氨基酸缺失混合物（DO medium supplements）同義名：
Yeast Media, Amino Acid Dropout Mixes
Yeast Synthetic Drop-out Medium Supplements
Complete Supplement Mixture (CSM)
Amino Acid Supplement (Drop-Out Mixture)
酵母營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基：
酵母選擇營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基（Synthetic Dropout Media, SD Media）多用來營養(yǎng)缺陷型標記基因的篩選和酵母轉化。這類培養(yǎng)基的配制根據(jù)商業(yè)化產(chǎn)品的區(qū)別有兩種方式。
*種方式：無氨基酸酵母氮源基礎+葡萄糖+選擇性氨基酸混合物（YNB without amino acids + glucose+ DO Supplement）
第二種方式：酵母基本培養(yǎng)基SD Base+選擇性氨基酸混合物（Yeast Minimal Base——SD Base + DO Supplement）
- 商業(yè)化SD Base與YNB的差別在于前者已添加葡萄糖。
- 有研究顯示，葡萄糖與氨基酸一起高壓滅菌會發(fā)生化學反應，培養(yǎng)基會變色，由淺黃到深褐色不等，可能對細胞的生長產(chǎn)生一些影響，但一般情況下不會影響實驗。因此，很多實驗室經(jīng)過驗證或通過對自身實驗體系的評估，還是傾向用【第二種方式】來配制選擇性缺陷*培養(yǎng)基。
- 我司（懋康生物）建議客戶根據(jù)自身需求來選擇產(chǎn)品和配制培養(yǎng)基。
酵母營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基工作原理：
特異的酵母營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基用于選擇培養(yǎng)含特異載體的酵母或雜交篩選。其工作原理如下（以基于Matchmarker GAL4-based two hybrid assay系統(tǒng)用到的載體為例）：
誘餌載體（pGBKT7-Bait）含合成色氨酸（Trp）的基因，誘捕載體（pGADT7-Prey）含合成亮氨酸（Leu）的基因。前者的親代酵母菌株（如Y2HGold）本身不含Trp基因，在Trp缺失的培養(yǎng)基上無法生長。當誘餌載體（pGBKT7-Bait）成功轉入Y2HGold，其在Trp缺失的培養(yǎng)基【即SD-Trp單缺培養(yǎng)基】上就能正常生長。同理，后者的親代酵母菌株（如Y187）本身不含Leu基因，在Leu缺失的培養(yǎng)基上無法生長。但當誘捕載體（pGADT7-Prey）成功轉入Y187，其在Leu缺失的培養(yǎng)基【即SD-Leu單缺培養(yǎng)基】上能正常生長。
選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）類別和應用：
不管是*種方式還是第二種方式配制的酵母選擇營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基（SD Media）配制的關鍵在于選擇合適的選擇性/缺陷型氨基酸混合物（DO supplement）來配制特定的培養(yǎng)基，從而滿足特定的需求。如何選擇合適的選擇性氨基酸混合物，見表1。
根據(jù)氨基酸缺失數(shù)目分為單缺氨基酸混合物（Single Dropout Supplements，SDO），雙缺氨基酸混合物（Double Dropout Supplements，DDO），以此類推。
主要應用：
- 營養(yǎng)缺陷型表型的確認
- 酵母轉化陽性菌株的篩選
- 酵母雙雜交篩選
- 酵母單雜交選擇
表1. 選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）類別和應用 |
類型 | 應用 | 名稱 | MKbio編號 | Clontech編號 |
SDO（Single Dropout Supplements）（單缺） | 外源基因在酵母中的表達、異源基因功能互補、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)初始質粒轉化 | DO Supplement -His | MS6316-10G | 630415 |
DO Supplement -Leu | MS6317-10G | 630414 |
DO Supplement -Trp | MS6318-10G | 630413 |
DO Supplement -Ura | MS6319-10G | 630416 |
DDO（Double Dropout Supplements） 配制酵母選擇營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基的氨基酸混合物（雙缺） | 外源基因在酵母中的表達、異源基因功能互補、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)初始質粒轉化免疫共沉淀、Y187和AH109酵母交配實驗、接合型二倍體篩選 | DO Supplement -His/-Leu | MS6320-10G | 630418 |
DO Supplement -His/-Ura | MS6321-10G | 630422 |
DO Supplement -Leu/-Trp | MS6322-10G | 630417 |
DO Supplement -Met/-Trp | MS6323-10G | 630431 |
DO Supplement -Trp/-Ura | MS6324-10G | 630427 |
DO Supplement -Trp/-His | MS6325-10G | / |
DO Supplement -Ura/-Leu | MS6326-10G | / |
TDO（Triple Dropout Supplements） 配制酵母選擇營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基的氨基酸混合物（三缺） | 外源基因在酵母中的表達、異源基因功能互補、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)報告基因檢測、Y187和AH109酵母交配實驗后報告基因分析（His3，Ade2） | DO Supplement -His/-Leu/-Trp | MS6331-10G | 630419 |
DO Supplement -His/-Leu/-Ura | MS6332-10G | 630423 |
DO Supplement -His/-Trp/-Ura | MS6333-10G | 630424 |
DO Supplement -Leu/-Met/-Trp | MS6334-10G | 630430 |
DO Supplement -Leu/-Trp/-Ura | MS6335-10G | 630426 |
QDO（Quadruple Dropout Supplements） 配制酵母選擇營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基的氨基酸混合物（四缺） | 酵母雙雜交系統(tǒng)和酵母三雜交系統(tǒng)報告基因檢測、Y187和AH109酵母交配實驗后報告基因分析（His3,Ade2） | DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp | MS6341-10G | 630428 |
DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp | MS6342-10G | 630429 |
DO Supplement -His/-Leu/-Trp/-Ura | MS6343-10G | 630425 |
選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）訂購信息：現(xiàn)貨供應，性價比高，。
品牌 | 名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格（元） | 對應Clontech |
MKbio | DO Supplement -His | MS6316-10G | 10g | 418 | 630415 |
MKbio | DO Supplement -Leu | MS6317-10G | 10g | 418 | 630414 |
MKbio | DO Supplement -Trp | MS6318-10G | 10g | 418 | 630413 |
MKbio | DO Supplement -Ura | MS6319-10G | 10g | 418 | 630416 |
MKbio | DO Supplement -His/-Leu | MS6320-10G | 10g | 418 | 630418 |
MKbio | DO Supplement -His/-Ura | MS6321-10G | 10g | 418 | 630422 |
MKbio | DO Supplement -Leu/-Trp | MS6322-10G | 10g | 418 | 630417 |
MKbio | DO Supplement -Met/-Trp | MS6323-10G | 10g | 418 | 630431 |
MKbio | DO Supplement -Trp/-Ura | MS6324-10G | 10g | 418 | 630427 |
MKbio | DO Supplement -Trp/-His | MS6325-10G | 10g | 418 | / |
MKbio | DO Supplement -Ura/-Leu | MS6326-10G | 10g | 418 | / |
MKbio | DO Supplement -His/-Leu/-Trp | MS6331-10G | 10g | 418 | 630419 |
MKbio | DO Supplement -His/-Leu/-Ura | MS6332-10G | 10g | 418 | 630423 |
MKbio | DO Supplement -His/-Trp/-Ura | MS6333-10G | 10g | 418 | 630424 |
MKbio | DO Supplement -Leu/-Met/-Trp | MS6334-10G | 10g | 418 | 630430 |
MKbio | DO Supplement -Leu/-Trp/-Ura | MS6335-10G | 10g | 418 | 630426 |
MKbio | DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp | MS6341-10G | 10g | 418 | 630428 |
MKbio | DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp | MS6342-10G | 10g | 418 | 630429 |
MKbio | DO Supplement -His/-Leu/-Trp/-Ura | MS6343-10G | 10g | 418 | 630425 |
【重要消息】：
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相關產(chǎn)品：產(chǎn)品具體信息。
品牌 | 名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格（元） | 對應Clontech |
MKbio | YPD Agar Medium | MS6301-350G | 350g | 550 | 630410 |
MKbio | YPD Medium | MS6302-250G | 250g | 438 | 630409 |
MKbio | YPDA Agar Medium | MS6303-350G | 350g | 550 | 630465 |
MKbio | YPDA Medium | MS6304-250G | 250g | 438 | 630464 |
MKbio | YNB Without Amino Acids | MS6305-100G | 100g | 330 | 291940（Difco） |
MKbio | YNB Without Amino Acids | MS6305-500G | 500g | 1450 | 291940（Difco） |
MKbio | Minimal SD Agar Base | MS6311-467G | 467g | 1428 | 630412 |
MKbio | Minimal SD Base | MS6312-267G | 267g | 768 | 630411 |
MKbio | Minimal SD Agar Base Gal/Raf | MS6313-270G | 270g | 1428 | 630421 |
MKbio | Minimal SD Base Gal/Raf | MS6314-185G | 185g | 988 | 630420 |
【特別提醒】：
- 我司（懋康生物）可根據(jù)需求定制只符合您的缺陷型氨基酸混合物，有求并有應，詳情。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供產(chǎn)品。
