Stbl3 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞

產(chǎn)品標簽：

Stbl3；Stbl2；HB101；Stable；Direct repeats 直接重復(fù)片段；Lentiviral expression vectors 慢病毒表達載體；In-fusion 一步法克隆檢測試劑盒；

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產(chǎn)品組分：

菌株描述

Stbl3菌株來源于大腸桿菌HB101菌株，特別適用于克隆不穩(wěn)定插入片段比如含有直接重復(fù)序列的慢病毒DNA。與*0菌株不同，Stbl3菌株減少了存在于慢病毒表達載體和一些其他腺病毒載體中長末端重復(fù)序列（LTRs）的同源重組頻率，有效降低錯誤重組。Stbl3有更高的基因組克隆容量。此菌株含鏈霉素抗性。

Stbl3菌株基因型：F-mcrB mrrhsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ-leumtl-1

產(chǎn)品描述

本品是Stbl3菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細胞，可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率＞10⁸ cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。

注意事項

1）   對不穩(wěn)定DNA克隆或逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒載體克隆，涂板后應(yīng)在30℃培養(yǎng)，以減少錯誤重組的發(fā)生概率。

2）   制備高純度病毒質(zhì)粒，需使用新鮮轉(zhuǎn)化的平板接菌，新鮮菌液提取質(zhì)粒，菌液不可低溫保存后使用。

3）   對不穩(wěn)定的克隆或病毒質(zhì)粒優(yōu)先以質(zhì)粒狀態(tài)保存，盡量避免以轉(zhuǎn)化在大腸桿菌細胞的方式保存質(zhì)粒。

4）   轉(zhuǎn)化時SOC或LB培養(yǎng)基均可用，前者能提高轉(zhuǎn)化效率約20%。

5）   感受態(tài)細胞必須用干冰運輸。感受態(tài)細胞應(yīng)在-80℃保存，不可反復(fù)凍融且放置時間過長，否則會減低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率。

6）   醉好在冰上融化感受態(tài)細胞。

7）   進行轉(zhuǎn)化操作時，需在相應(yīng)溫度及無菌條件下進行。

8）   為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功，可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到zui低。

9）   產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10 pg/μl)，供對照實驗用。

10）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

Stbl3感受態(tài)細胞常見問題【詳細問題請見懋康網(wǎng)站MKbio介紹】

1.      使用Stbl3感受態(tài)細胞時，如何提高病毒質(zhì)粒的產(chǎn)量？

2.      是否能用*0或DH5α代替Stable或Stbl3擴繁病毒質(zhì)粒？

3.        使用Stbl3，*0感受態(tài)細胞構(gòu)建或擴增病毒質(zhì)粒時，平板上長出的克隆有的偏大，有的偏小，如何選擇哪種克隆用于后續(xù)實驗？

4.      Stbl3的基因型為F-mcrB mrrhsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (StrR) xyl-5 λ-leu mtl-1，如何理解各個基因？

5.      轉(zhuǎn)化過程中感受態(tài)細胞的復(fù)蘇必須使用SOC培養(yǎng)基？

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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Stbl3化學(xué)感受態(tài)細胞（不穩(wěn)定DNA轉(zhuǎn)化）

Stbl3化學(xué)感受態(tài)細胞（不穩(wěn)定DNA轉(zhuǎn)化）