（1）HAT選擇雜交瘤細胞 　　　

    脾細胞和骨髓瘤細胞經(jīng)PEG處理后，形成多種細胞的混合體，只有脾細胞與骨髓細胞形成的雜交瘤細胞才有意義。在HAT選擇培養(yǎng)液中培養(yǎng)時，由于骨髓瘤細胞缺乏胸苷激酶或次黃嘌呤*核糖轉移酶，故不能生長繁殖，而雜交瘤細胞具有上述兩種酶，在HAT選擇培養(yǎng)液可以生長繁殖。

　　在用HAT選擇培養(yǎng)1～2天內，將有大量瘤細胞死亡，3～4天后瘤細胞消失，雜交細胞形成小集落，HAT選擇培養(yǎng)液維持7～10天后應換用HT培養(yǎng)液，再維持2周，改用一般培養(yǎng)液。在上述選擇培養(yǎng)期間，雜交瘤細胞布滿孔底1/10面積時，即可開始檢測特異性抗體，篩選出所需要的雜交瘤細胞系。在選擇培養(yǎng)期間，一般每2～3天換一半培養(yǎng)液。

（2）抗體的檢測　　 

    檢測抗體的方法應根據(jù)抗原的性質、抗體的類型不同，選擇不同的篩選方法，一般以快速、簡便、特異、敏感的方法為原則。放射免疫測定（RIA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）及免疫熒光試驗為常用的檢測方法。

    放射免疫測定可用于可溶性抗原、細胞McAb的檢測；酶聯(lián)免疫吸附試驗可用于可溶性抗原、細胞和病毒等McAb的檢測；免疫熒光試驗則適合于細胞表面抗原的McAb的檢測；其它還有間接血凝試驗、細胞毒性試驗、旋轉粘附雙層吸附試驗等方法。