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牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430 kDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在western blot中作為Blocking agent。
BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中,因為有些酶在低濃度下不穩(wěn)定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保護”或“載體”作用,不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數(shù)底物DNA而言,BSA可以使酶切更*,并可實現(xiàn)重復切割。在37℃,酶切反應超過1h時,BSA可以使酶更加穩(wěn)定,因為在不含BSA的反應緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學物質(zhì)。
BSA在內(nèi)切酶的緩沖液的作用:
1.BSA是酶的穩(wěn)定劑,防止酶的分解和非特異性吸附;
2.BSA能減輕有些酶的變性,能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學因素引起的變性的至于作用機理我不是很清楚,可能是因為它結(jié)構(gòu)中有17個二硫鍵,和一個巰基,巰基的化學反應很活潑,二硫鍵有抗氧化還原的作用,因此可與多種陽離子,陰離子和小分子結(jié)合;
3.BSA能防止酶吸附到管壁而損失。
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