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上海澤葉生物科技有限公司
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閱讀：1865發(fā)布時(shí)間：2016-12-12
INTERFERin™-HTS
--polyplus新型轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：
》 適用于siRNA的高通量轉(zhuǎn)染
》 具有高重復(fù)性的結(jié)果
》 10 ~50 nM siRNA可達(dá)沉默效率
》 高性價(jià)比——每孔所用轉(zhuǎn)染試劑較少，實(shí)驗(yàn)花費(fèi)少
》 可進(jìn)行正向、反向和批量操作，與血清和抗生素兼容
》 貯存方便：試劑為水溶液，4度可保存一年
INTERFERin™-HTS是新一代siRNA轉(zhuǎn)染試劑，特別針對(duì)高通量應(yīng)用而研發(fā)，利用較少的試劑即可達(dá)到高基因沉默效率、高重復(fù)性結(jié)果和*的細(xì)胞活性。INTERFERin™-HTS 性價(jià)比高、操作簡(jiǎn)便、與血清和抗生素兼容，可在96孔板和384孔板進(jìn)行正向、反向和批量操作。
高基因沉默效率、低細(xì)胞毒性
使用INTERFERin™-HTS轉(zhuǎn)染10 nM PLK1-siRNA，進(jìn)行細(xì)胞死亡誘導(dǎo)的表型分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該基因沉默能夠誘導(dǎo)90%以上的細(xì)胞死亡（圖1）。同時(shí)，INTERFERin™-HTS轉(zhuǎn)染不帶目的基因的siRNA 的實(shí)驗(yàn)表明該轉(zhuǎn)染試劑的細(xì)胞毒性很?。?9% ± 7%的細(xì)胞活性）。
圖1. 在384孔板中INTERFERin™-HTS將siRNA轉(zhuǎn)染到 Hela細(xì)胞，的誘導(dǎo)細(xì)胞死亡
誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的siRNA (PLK1， 0.05Ul) 反向轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞， 陰性對(duì)照為不帶目的基因siRNA （0.05uL），轉(zhuǎn)染后72小時(shí)，通過熒光顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞活性。
高重復(fù)性結(jié)果
INTERFERin™-HTS在不同水平的高重復(fù)性結(jié)果：
不同孔間 ? 每個(gè)樣本進(jìn)行三個(gè)復(fù)孔實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示各樣本的復(fù)孔間差異極小，可取三復(fù)孔間任一數(shù)據(jù)作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果（圖1）
不同實(shí)驗(yàn)間 ?利用同一批次的INTERFERin™-HTS進(jìn)行三個(gè)單獨(dú)的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，顯示出相同的沉默效率（圖2）
不同批次間 ?利用三個(gè)不同批次的INTERFERin™-HTS進(jìn)行轉(zhuǎn)染顯示出高度一致的結(jié)果（圖3）
圖2. 96孔板中不同實(shí)驗(yàn)間的重復(fù)性結(jié)果
在3個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)中，用INTERFERin™-HTS將10 nM GL3Luc siRNA轉(zhuǎn)染到能夠穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶基因的A549細(xì)胞，以0.05 μL的INTERFERin™-HTS做陰性對(duì)照。轉(zhuǎn)染后48小時(shí)檢測(cè)熒光素酶表達(dá)。
圖3. 96孔板中不同批次間的重復(fù)性結(jié)果
用3個(gè)不同批次的INTERFERin™-HTS將10 nM GL3Luc siRNA轉(zhuǎn)染到能夠穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶基因的A549細(xì)胞， 0.05 μL的INTERFERin™-HTS做陰性對(duì)照。轉(zhuǎn)染后48小時(shí)檢測(cè)熒光素酶表達(dá)。
高基因沉默效率
用INTERFERin™-HTS轉(zhuǎn)染內(nèi)源性的lamin A/C siRNA，其基因沉默效率高于目前市場(chǎng)上的另外三個(gè)常規(guī)轉(zhuǎn)染試劑。
圖4. 與其他同類試劑比較， INTERFERin™-HTS轉(zhuǎn)染siRNA 的沉默效率更高
在96孔板中， 用10 nM lamin A/C siRNA反向轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞， 24小時(shí)后通過分支DNA分析檢測(cè)lamin A/C的表達(dá)，用GAPDH作對(duì)照。
*的性價(jià)比
與其它同類試劑比較，使用較少量的INTERFERin™-HTS即可獲得基因表達(dá)的高沉默率；同規(guī)格條件下，該試劑可轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)板數(shù)至少為其它試劑的2倍。
表1. 96孔板中每孔所需試劑體積（INTERFERin™-HTS和其它同類試劑）和1.5 mL試劑所能轉(zhuǎn)染的板數(shù)，實(shí)驗(yàn)采用siRNA的反向轉(zhuǎn)染。
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