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上海研盟生物科技有限公司
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廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-01-15 14:57:28瀏覽次數(shù):186次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線“Anti-Echidnotoxin抗體,蝮蛇蛇毒蛋白抗體"抗體規(guī)格0.1ml、0.2ml、1ml,抗體產(chǎn)品有效期一年,質(zhì)保三個(gè)月,質(zhì)保期內(nèi)出現(xiàn)任何質(zhì)量問題或是出不了實(shí)驗(yàn)結(jié)果均可免費(fèi)退換:
上海研盟生物科技有限公司Anti-Echidnotoxin抗體,蝮蛇蛇毒蛋白抗體*,主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中。說明書隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線客服索取。客服
簡單介紹:
中文名稱:蝮蛇蛇毒蛋白抗體
英文名稱:Anti-Echidnotoxin
產(chǎn)品編號(hào):byk-0602R
產(chǎn)品別名:
產(chǎn)品用途:科研實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品價(jià)格:請(qǐng)報(bào)價(jià)
說明書:請(qǐng)?zhí)砑涌头苯铀魅?/p>
抗體來源:該指標(biāo)有兩種產(chǎn)品,一種是兔來源抗體,一種是鼠來源抗體
克隆類型:兔來源為多克隆抗體,鼠來源單克隆抗體
交叉反應(yīng):請(qǐng)索取說明書查看
性 狀:Lyophilized or Liquid
濃 度:1mg/1ml
亞 型:IgG
純化方法: affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
保存條件: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Anti-Echidnotoxin抗體,蝮蛇蛇毒蛋白抗體產(chǎn)品介紹:No data available.
Western-blotting試驗(yàn)方法:
蛋白提樣品制備
1、 將培養(yǎng)液吸入至15 ml離心管中,于2500 rpm離心5 min。
2、 棄上清,加入5 ml PBS并用槍輕輕吹打洗滌,然后2500 rpm離心5 min。棄上清后用PBS重復(fù)洗滌一次。
3、 用槍吸干上清后,加100 μl裂解液(含PMSF)冰上裂解30 min,裂解過程中要經(jīng)常彈一彈以使細(xì)胞充分裂解。
4、將裂解液4℃、12000 rpm離心5 min,取上清分裝于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。
5、BCA法測蛋白濃度
SDS-PAGE電泳
1、 玻璃板對(duì)齊后放入夾中卡緊,然后垂直卡在架子上準(zhǔn)備灌膠。
2、按前面方法配10%分離膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。灌膠時(shí),可用10 ml槍吸取5 ml膠沿玻璃放出,待膠面升到綠帶中間線高度時(shí)即可。然后膠上加一層水,液封后的膠凝的更快。(灌膠時(shí)開始可快一些,膠面快到所需高度時(shí)要放慢速度。操作時(shí)膠一定要沿玻璃板流下,這樣膠中才不會(huì)有氣泡。加水液封時(shí)要慢,否則膠會(huì)被沖變型。)
3、 當(dāng)水和膠之間有一條折射線時(shí),說明膠已凝了。再等3 min使膠充分凝固就可倒去膠上層水并用吸水紙將水吸干。
4、 按方法配4%的濃縮膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。將剩余空間灌滿濃縮膠后將梳子插入孔槽。灌膠時(shí)也要使膠沿玻璃板流下以免膠中有氣泡產(chǎn)生。插梳子時(shí)要使梳子保持水平。待到濃縮膠凝固后,兩手分別捏住梳子的兩邊豎直向上輕輕將其拔出。
5、 用水沖洗濃縮膠,將其放入電泳槽中。
6、 測完蛋白含量后,計(jì)算含20-50 μg蛋白(根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行選擇,沒有固定的量)的溶液體積即為上樣量。取出上樣樣品至200 μl的EP管中,加入5×SDS 上樣緩沖液至終濃度為1×。上樣前要將樣品于沸水中煮5-10 min使蛋白變性。
7、 加入足夠的電泳緩沖液后開始準(zhǔn)備上樣。(電泳液至少要漫過內(nèi)測的小玻璃板。)用微量進(jìn)樣器貼壁吸取樣品,將樣品吸出不要吸進(jìn)氣泡。將加樣器針頭插至加樣孔中緩慢加入樣品(包括一孔做可視的蛋白marker)。(加樣太快可使樣品沖出加樣孔,若有氣泡也可能使樣品溢出。加入下一個(gè)樣品時(shí),進(jìn)樣器需在外槽電泳緩沖液中洗滌數(shù)次,以免交叉污染)
8、電泳:濃縮膠時(shí)用80-100 V跑,到分離膠以后用150-200 V跑,總時(shí)間2 h左右,電泳至溴酚蘭剛跑出即可終止電泳,進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。
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CD63/MLA1 /RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記抗溶酶體膜糖蛋白抗體IgG
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