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更新時(shí)間:2017-11-13 14:00:23瀏覽次數(shù):317次
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“大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒“進(jìn)口原裝ELISA抗體對(duì)組裝,效果*,提供、免費(fèi)代測服務(wù),咨詢:
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大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒中的洗滌
洗滌是ELISA實(shí)驗(yàn)中是zui多次數(shù)的操作,也是非常重要的步驟。不嚴(yán)格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交叉污染現(xiàn)象,實(shí)驗(yàn)重復(fù)效果差的現(xiàn)象。不管用多道加樣器、洗瓶、吸管,還是洗板機(jī),嚴(yán)格按照說明書操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時(shí)間和洗滌次數(shù)。注意標(biāo)準(zhǔn)化操作將減少實(shí)驗(yàn)誤差和不同實(shí)驗(yàn)之間的誤差。操作者常出現(xiàn)洗板不干凈現(xiàn)象,請(qǐng)比照操作:
a)洗液不要溢出孔外,以免污染相鄰的孔,特別是每次洗板的前兩遍,若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔,其造成的交叉污染的孔是洗不掉的,背景肯定會(huì)增高。
b)特別注意:設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候要考慮實(shí)驗(yàn)孔的位置,保證甩掉洗液時(shí),空白孔、低濃度孔或陰性對(duì)照組在上面或一側(cè)或分開。同時(shí)注意甩掉洗液的動(dòng)作翻轉(zhuǎn)(從正上方旋轉(zhuǎn)120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉(zhuǎn)來甩液體!甩出后以直線方式補(bǔ)2-3次甩出液體。
c)用干凈的濾紙,不要用衛(wèi)生紙,因?yàn)榧?xì)小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底,導(dǎo)致洗板不干凈,結(jié)果偏高或偏低,重復(fù)孔的數(shù)值也會(huì)相差很大。
d)每次拍板不要重復(fù)在一個(gè)地方拍,特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過輕,否則拍不干凈,拍板很用力不會(huì)對(duì)蛋白有什么影響。但注意不要太重,以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下,zui后一次一定要扣干凈。
e)不能減少洗液體積、洗板時(shí)間和次數(shù)。洗板時(shí)間太短,洗板效果不佳。延長洗板時(shí)間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。
檢測范圍和保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃
2.有效期:6個(gè)月
大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒簡單介紹:
品牌:進(jìn)口/國產(chǎn)
英文名稱:Rat Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K Elisa Kit
產(chǎn)品規(guī)格:
48T(48T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測37個(gè)樣本,其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)空白對(duì)照。48T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測40個(gè)樣本,其他有7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)空白對(duì)照。 )
96T(96T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測85個(gè)樣本,其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)空白對(duì)照。96T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測90個(gè)樣,7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品控 1個(gè)空白對(duì)照。)
產(chǎn)品用途:本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。
產(chǎn)品特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
有效期:6個(gè)月
保存條件:2-8℃
實(shí)驗(yàn)原理:
1.本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物質(zhì)濃度。
2. 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被待測物質(zhì)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物質(zhì)濃度。
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