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技術(shù)文章

NEPA 21基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)

閱讀:798發(fā)布時(shí)間:2016-12-8

經(jīng)過近30年的發(fā)展革新,電轉(zhuǎn)染已成為基因的功能研究領(lǐng)域中*的技術(shù)手段。華粵行儀器有限公司作為中國*代理商,特向您推薦來自日本NEPA GENE公司的基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)NEPA21:
  NEPA GENE公司專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)細(xì)胞電轉(zhuǎn)染儀及電融合儀等,其生產(chǎn)的CUY21系列電轉(zhuǎn)染儀在研究領(lǐng)域中久負(fù)盛名,已被數(shù)百篇文獻(xiàn)引用,其中不乏高水平雜志的文章,如Nature、Cell、PNAS、Genes & Dvelopment等。
  2011年,NEPA GENE推出新一代型的NEPA21基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。與傳統(tǒng)的電轉(zhuǎn)儀相比,NEPA21采用全新設(shè)計(jì)的電轉(zhuǎn)程序,特別適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞、離體組織或動(dòng)物活體的轉(zhuǎn)染。NEPA21*的反向?qū)耄≧everse Transfer)及電壓衰減(Voltage Decay)設(shè)計(jì),可在提高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí),大大提高細(xì)胞存活率,已獲日本認(rèn)證。

高轉(zhuǎn)染效率和高存活率、不需要特殊的轉(zhuǎn)染試劑盒

  目前普遍使用的的轉(zhuǎn)染方法都需要化學(xué)試劑的幫助,通常每個(gè)樣品需要花費(fèi)$8、$12、甚至$16不等。這些輔助試劑可能會有副作用,影響細(xì)胞的生長速度、凋亡或藥物敏感性等。此外,雖然電穿孔轉(zhuǎn)染法已經(jīng)發(fā)展了近30年,但針對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞時(shí),沒有任何一個(gè)廠家的電轉(zhuǎn)染設(shè)備是不需要化學(xué)試劑輔助的——直到NEPA21的出現(xiàn)!
  NEPA GENE公司堅(jiān)持開發(fā)zui精密的DNA、RNA轉(zhuǎn)染設(shè)備,改變傳統(tǒng)的需要特殊試劑輔助的轉(zhuǎn)染方式。NEPA GENE致力于電脈沖芯片、程序設(shè)計(jì)等多方面的技術(shù)革新,簡單地說,NEPA21電轉(zhuǎn)染儀結(jié)合采用高精度低壓脈沖、的脈沖時(shí)間控制、瞬間電極反向放電等技術(shù),從而實(shí)現(xiàn)了不需特殊試劑輔助,也能的轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞、組織、甚至是活體動(dòng)物。(點(diǎn)擊此處可進(jìn)一步了解NEPA21的技術(shù)突破)

體外(In Vitro)轉(zhuǎn)染/細(xì)胞轉(zhuǎn)染

  細(xì)胞可在懸?。↖n Suspension)、或貼壁(In Adherent) 狀態(tài)下進(jìn)行轉(zhuǎn)染。適用于各種細(xì)胞,包括各種難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,如原代細(xì)胞、干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、血液細(xì)胞、免疫細(xì)胞等。
  細(xì)胞在懸浮狀態(tài)下進(jìn)行電轉(zhuǎn)染時(shí),可與外源基因360度的接觸,穿孔效率和基因?qū)胄?。NEPA21設(shè)計(jì)了多種規(guī)格的電轉(zhuǎn)杯,以適應(yīng)不同細(xì)胞數(shù)量的轉(zhuǎn)染需要。
  但是,有些原代細(xì)胞是終末分化的,如原代神經(jīng)元細(xì)胞、乳鼠心肌細(xì)胞等。這些細(xì)胞一旦從活體組織中分離出來貼壁培養(yǎng),便不可消化傳代,也就無法實(shí)現(xiàn)懸浮狀態(tài)的轉(zhuǎn)染。針對這種情況,NEPA GENE開發(fā)了適用于普通細(xì)胞培養(yǎng)板的貼壁轉(zhuǎn)染電極。
  NEPA21的設(shè)計(jì)的電穿孔程序,不僅能在細(xì)胞膜上形成通道,還能作用于核膜(nuclear envelope),從而將DNA直接運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞核中。因此,即使是終末分化的細(xì)胞,DNA也能在不依賴于細(xì)胞分裂的情況下進(jìn)入到細(xì)胞核中。

離體(Ex Vivo)/活體(In vivo)轉(zhuǎn)染

  配合多達(dá)250多種活體轉(zhuǎn)染電極,NEPA21可覆蓋幾乎所有的組織、器官、動(dòng)物轉(zhuǎn)染需求。例如,大鼠或小鼠的肌肉、皮膚、肝臟、腎臟、腦部、視網(wǎng)膜、角膜等組織,還可用于轉(zhuǎn)染魚、蜜蜂等動(dòng)物,以及轉(zhuǎn)染植物種子、獲得轉(zhuǎn)基因植株。。
  這些電極可以讓您嘗試許多以前很難實(shí)現(xiàn)的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),如果您有新的idea,NEPA GENE公司還可以根據(jù)客戶的天才設(shè)想,定制特殊的電極以滿足特殊部位的轉(zhuǎn)染需要。

NEPA GENE應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué)研究的歷史

  NEPA GENE的產(chǎn)品在發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域有很長的使用歷史。
  二十世紀(jì)90年代初,人們剛開始把電穿孔技術(shù)用于發(fā)育生物學(xué)研究的時(shí)發(fā)現(xiàn),電脈沖對動(dòng)物造成的傷害很大,因而后續(xù)的研究難以進(jìn)行。而病毒法雖然也能達(dá)到較好的效率,但存在轉(zhuǎn)染部位不夠特異的問題,而且存在免疫反應(yīng)或其他安全隱患。
  NEPA GENE的創(chuàng)始人Mr Hayakawa(早川)當(dāng)時(shí)是某的代理商,受日本的實(shí)驗(yàn)室邀請,共同對電穿孔技術(shù)和儀器進(jìn)行革新。1994年技術(shù)改良的成功后,日本在雞胚活體轉(zhuǎn)染技術(shù)和應(yīng)用上,達(dá)到了世界水平。早川將改進(jìn)后的技術(shù)和儀器申請了,并成立了NEPA GENE公司,開始自主研發(fā)、生產(chǎn)電轉(zhuǎn)染儀。
  《Electroporation And Sonoporation in Developmental Biology》是介紹電穿孔技術(shù)在發(fā)育生物學(xué)中的應(yīng)用的專業(yè)書籍。圖書的主編暨雞胚活體轉(zhuǎn)染的Mr Nakamura在*章明確的肯定了早川的貢獻(xiàn)。


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