兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒的制備要點(diǎn)：

1、隨著人們對病原體感染與機(jī)體免疫應(yīng)答的逐步認(rèn)識，以抗原抗體特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的，更為快速簡便的免疫檢驗(yàn)方法就應(yīng)運(yùn)而生了。
2、試驗(yàn)中各個(gè)操作步驟常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，希望能夠?qū)σ恍┏醪綄W(xué)習(xí)者有所幫助：這些難于采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法檢測的病原體感染診斷治療的要求，迫使人們必須去尋找其他的檢測途徑，直接的或是間接的。
兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒檢測方法概述：

1）  間接法測抗體：將特異性抗原包被在固相載體上，形成固相抗原，加入待檢標(biāo)本（含相應(yīng)抗體），其中抗體與固相抗原形成抗原-抗體復(fù)合物，再加入酶標(biāo)記的抗抗體（抗人免疫球蛋白抗體，亦稱二抗），與上述抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。此時(shí)加入底物，復(fù)合物上的酶則催化底物而顯色。

2）  雙抗體夾心法測抗原：將已知的特異性抗體包被在固相載體上，形成固相抗體，加入待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗原)，抗原與固相抗體結(jié)合成復(fù)合物，再加入特異性酶標(biāo)抗體，使之與已形成的抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合，當(dāng)加入與酶相應(yīng)的底物時(shí)，酶催化底而顯色，根據(jù)顏色的有無和顏色的深淺對待測抗原進(jìn)行定性和定量。

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒競爭法測抗原：

1、將特異性抗體與固相聯(lián)結(jié)，形成固相抗體，加入待測標(biāo)本（含相應(yīng)抗原）和相應(yīng)的一定量的酶標(biāo)抗原，待測標(biāo)本中的抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合，待測標(biāo)本中抗原含量越高，則與固相抗體結(jié)合亦越多，使得酶標(biāo)抗原與固相抗體結(jié)合的機(jī)會就越少，甚至沒有機(jī)會結(jié)合。加入底物后不顯色或顯色很淺，顯色深者為陰性。
2、酶聯(lián)免疫試驗(yàn)的量反應(yīng)分析：不同的酶聯(lián)免疫方法檢測結(jié)果的OD值均與標(biāo)本中待檢的抗原或抗體的量相關(guān)（間接法和夾心法正相關(guān)，競爭法負(fù)相關(guān)），因此可以利用OD值對標(biāo)本中的待檢物質(zhì)進(jìn)行定量分析。
3、酶聯(lián)免疫試驗(yàn)質(zhì)反應(yīng)分析：ELISA檢測試劑盒根據(jù)檢測標(biāo)本OD值，對標(biāo)本中待測物質(zhì)做出有或無的判定（即陽性反應(yīng)或陰性反應(yīng)）

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