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豚鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)elisa試劑盒

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所  在  地鹽城市

更新時間:2017-12-08 10:55:23瀏覽次數:601次

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豚鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)elisa試劑盒的試劑準備:

1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:

500pg/ml

6號標準品)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

250pg/ml

5號標準品)

100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液

125pg/ml

4號標準品)

100ul5號標準品加入100ul的標準品稀釋液

62.5pg/ml

3號標準品)

100ul4號標準品加入100ul的標準品稀釋液

31.2pg/ml

2號標準品)

100ul3號標準品加入100ul的標準品稀釋液

15.6pg/ml

1號標準品)

100ul2號標準品加入100ul的標準品稀釋液

0pg/ml

(空白對照)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

豚鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)elisa試劑盒的操作流程:

1.在各孔中加入標準品或樣品各100μL,37孵育90分鐘;

2.加入100μL 生物素化抗體工作液,37孵育60分鐘;

3.洗滌3次;

4.加入100μL酶結合物工作液,37孵育30分鐘;

5.洗滌5次;

6.加入90μL底物溶液,37孵育15分鐘左右;

7.加入50μL終止液,立即在450nm波長處測量OD值;

8.結果計算。

豚鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)elisa試劑盒的結果判斷與分析:

1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的LAM標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的LAM含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
3、檢測值范圍:0-480ng/ml
4、敏感度:0.1ng/ml

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