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南京金益柏生物科技有限公司
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更新時間：2017-05-09 16:08:17瀏覽次數(shù)：143次
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豬胰島素樣生長因子1ELISA檢測試劑盒★南京金益柏★提問：ELISA的夾心法和競爭法的區(qū)別？回答：競爭法一般用于檢測無法同時與兩種抗體結合的小分子抗原，其原理為：
將針對小分子抗原的抗體包被在酶標板上，檢測時加入待測樣本，使樣本中的待測抗原與酶標板上的抗體結合。然后加入HRP酶標記的抗原，此抗原也可與酶標板上的抗體結合，由于酶標板上固著的抗體數(shù)量有限，因此當樣本中抗原的量越多，則HRP酶標記抗原
豬胰島素樣生長因子1ELISA檢測試劑盒
★南京金益柏★提問：ELISA的夾心法和競爭法的區(qū)別？回答：競爭法一般用于檢測無法同時與兩種抗體結合的小分子抗原，其原理為：
將針對小分子抗原的抗體包被在酶標板上，檢測時加入待測樣本，使樣本中的待測抗原與酶標板上的抗體結合。然后加入HRP酶標記的抗原，此抗原也可與酶標板上的抗體結合，由于酶標板上固著的抗體數(shù)量有限，因此當樣本中抗原的量越多，則HRP酶標記抗原可結合的包被抗體就越少，兩種抗原競爭結合包被抗體，所以稱為競爭法。接著加入HRP酶的底物TMB，TMB被酶催化發(fā)生顏色反應，當樣本中抗原量越多，代表酶標板孔內留下的HRP標記抗原越少，顯色也就越淺。百特純大分子Meretciel的測激素的ELISA試劑盒有些就是競爭法的。
夾心法又叫雙抗夾心法，用于檢測較大分子的抗原或抗體，又分為：雙抗體夾心法，用于檢抗原；和雙抗原夾心法用于檢抗體。以雙抗體夾心法為主，下面以雙抗體夾心法為例講解原理（雙抗原夾心法類似）：
首先將具有專一性之抗體包被（coating）于酶標板上，檢測時加入待測樣本，樣本中若含有待測抗原，則會與酶標板上包被的抗體專一性結合，然后加入另一種針對待檢抗原的抗體，通常稱為檢測抗體，包被抗體和檢測抗體將抗原夾在中間所以叫雙抗夾心。檢測抗體通常帶有HRP酶標記，接著加入HRP酶的底物TMB，TMB被酶催化發(fā)生顏色反應，樣本中抗原量越多則顯色越深?，F(xiàn)在很多ELISA試劑盒生產廠家比如：優(yōu)爾生和百特純大分子Meretciel將*-親和素放大系統(tǒng)引入雙抗夾心法，也就是在檢測抗體上標記*，然后加入HRP酶標記的親和素（或鏈親和素），利用親和素可以和*分子緊密結合的特性，將HRP酶連接到檢抗上，接著加入底物顯色。也有引入二抗的，如下圖，檢測抗體不標記，再加入HRP標記的二抗與檢測抗體結合
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