摘要：在2017年6月23日第八屆北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)論壇上，軍事醫(yī)學(xué)*章金剛研究員向大會(huì)做了題為“五指山近交系內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒（PERV）及無(wú)PERV傳染性新種群建立研究”的報(bào)告，宣布我國(guó)科學(xué)家在世界上通過(guò)遺傳選育的方式獲得無(wú)PERV傳染性的近交系小型豬。

在2017年6月23日第八屆北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)論壇上，軍事醫(yī)學(xué)*章金剛研究員向大會(huì)做了題為“五指山近交系內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒（PERV）及無(wú)PERV傳染性新種群建立研究”的報(bào)告，宣布我國(guó)科學(xué)家在世界上通過(guò)遺傳選育的方式獲得無(wú)PERV傳染性的近交系小型豬。

    豬是異種器官移植的**供體。而用于人的豬源異種器官移植兩大障礙之一，是豬內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒（porcine endogenous retrovirus, PERV）的潛在感染風(fēng)險(xiǎn)。PERV是一種以前病毒DNA形式整合入豬基因組中的反轉(zhuǎn)錄病毒，由PERV-gag、pol、env三基因組成，可隨細(xì)胞基因組的復(fù)制而復(fù)制。部分豬源細(xì)胞可釋放PERV病毒顆粒，并能感染多種體外培養(yǎng)的人源細(xì)胞。因此，消除PERV的潛在跨物種感染風(fēng)險(xiǎn)，是異種器官移植的必要安全考慮。

      解決PERV風(fēng)險(xiǎn)的途徑有兩種。一種是通過(guò)基因修飾技術(shù)去除豬體內(nèi)PERV基因。代表成果是哈佛醫(yī)學(xué)院遺傳學(xué)教授喬治•丘奇和楊璐菡博士團(tuán)隊(duì)，利用新的基因編輯技術(shù)CRISPR/Cas9，一次性的敲除了隱藏在豬基因組中的62個(gè)PERV-pol基因片段，體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證病毒的感染率被削弱了近1000倍，結(jié)果發(fā)表在2015年10月《Science》雜志。同年，該團(tuán)隊(duì)聯(lián)合創(chuàng)立了美國(guó)eGenesis生物技術(shù)公司，專注于將基于基因編輯的異種移植技術(shù)運(yùn)用到臨床醫(yī)療程序中。近日有報(bào)道稱，eGenesis公司經(jīng)過(guò)多基因修飾的PERV陰性豬即將出生。與此同時(shí)，我國(guó)多家科研團(tuán)隊(duì)也在嘗試采用基因編輯方法培育PERV陰性豬，并先后取得各種階段性進(jìn)展。

     排除PERV病毒潛在感染風(fēng)險(xiǎn)的另一種途徑，則是選育無(wú)PERV感染風(fēng)險(xiǎn)的豬。軍事醫(yī)學(xué)*的章金剛研究員、馬玉媛副研究員聯(lián)合蓋蘭德生物科技科學(xué)家馮書(shū)堂教授，另辟蹊徑，在世界上采用遺傳篩選的方法，經(jīng)過(guò)細(xì)胞共培養(yǎng)，采用PCR、RT-PCR、反轉(zhuǎn)錄酶活性檢測(cè)等方法進(jìn)行鑒定，通過(guò)初篩與確證實(shí)驗(yàn)，參照美國(guó)FDA的標(biāo)準(zhǔn)，在五指山小型豬近交系中篩選出無(wú)PERV傳染性的近交系小型豬個(gè)體。經(jīng)初步遺傳分析，所有篩選出的無(wú)PERV傳染性個(gè)體之間存在一定的遺傳規(guī)律。在這一重大發(fā)現(xiàn)基礎(chǔ)上，研究人員正在對(duì)篩選出的無(wú)PERV傳染性個(gè)體進(jìn)行全基因組重測(cè)序分析，現(xiàn)已證實(shí)其中1個(gè)個(gè)體為PERV-pol基因缺陷型。至此，研究團(tuán)隊(duì)不僅*次在上篩選出了無(wú)PERV病毒傳染性近交系豬，而且從基因水平上驗(yàn)證了PERV病毒無(wú)傳染性的原理。上述研究成果已申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明兩項(xiàng)，并即將在期刊雜志上發(fā)表論文。

     研究團(tuán)隊(duì)認(rèn)為，無(wú)PERV傳染性的小型豬近交系的選育成功，主要原因是五指山小型豬近交系經(jīng)過(guò)長(zhǎng)達(dá)28年的近交培育，已普遍具無(wú)C型病毒的遺傳特征，近交種群出現(xiàn)病毒感染性發(fā)生變異的個(gè)體。蓋蘭德生物科技有限公司正利用篩選出的無(wú)PERV傳染性近交系豬群體培育新品系，父母均為無(wú)PERV傳染性近交系豬的F1已于2017年5月底出生，研究團(tuán)隊(duì)將持續(xù)對(duì)其進(jìn)行無(wú)PERV 傳染性的監(jiān)測(cè)，未來(lái)有望進(jìn)一步揭示PERV病毒pol基因缺陷型豬的遺傳原理。相比較基因修飾的方法，近交系篩選的無(wú)病毒傳染性豬，具有更可靠的病毒安全性，避免多種基因修飾對(duì)豬健康生長(zhǎng)的潛在威脅，且可以大規(guī)模繁育，為批量生產(chǎn)安全標(biāo)準(zhǔn)的豬器官、組織與材料提供了保障。