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人磷酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒
*M(IgM)ELISA試劑盒樣品的收集、處理及保存方法:
1、血清→操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿→EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液→1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿→將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、保存→如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
*M(IgM)ELISA試劑盒的實驗操作中應注意以下條款:
●試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
●實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
●不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
●使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
●使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
●底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
●加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
●按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
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