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超聲波細(xì)胞破碎儀的維護(hù)保養(yǎng)及解決方案
閱讀：9 發(fā)布時(shí)間：2025-1-13超聲波細(xì)胞破碎儀又名超聲微波協(xié)同萃取儀，超聲波細(xì)胞裂解儀，超聲波納米材料粉碎機(jī)。超聲波細(xì)胞破碎儀由超聲波發(fā)生器和換能器兩大部分組成（有的配置有隔音箱）。具有破碎組織、細(xì)菌、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)，勻質(zhì)、乳化、混合、脫氣、崩解和分散、浸出和提取，加速反應(yīng)等功能，故廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、化學(xué)、制藥、食品、化妝品、環(huán)保等實(shí)驗(yàn)室研究及企業(yè)生產(chǎn)。
日常維護(hù)
1、溫度保護(hù)設(shè)置點(diǎn)必須比室溫或樣品溫度高5℃以上。當(dāng)發(fā)生溫度保護(hù)時(shí)可按SET健4秒以上，重新設(shè)置保護(hù)值。設(shè)錯(cuò)溫度時(shí)也可按SET鍵4秒以上復(fù)位。
2、嚴(yán)禁在變幅桿未插入液體內(nèi)(空載)時(shí)開機(jī)，否則會(huì)損壞換能器或超聲波發(fā)生器。
3、對(duì)各種細(xì)胞破碎量的多少，時(shí)間長(zhǎng)短，功率大小，有待用戶根據(jù)各種不同細(xì)胞再摸索確定。此儀器輸出功率較大，如選用Ф2、Ф3或Ф6變幅桿時(shí)，應(yīng)把功率開得小些，以免變幅桿過載而斷裂。
4、用一定時(shí)間后變幅桿末端會(huì)被空化腐蝕而毛，可用油石或銼刀銼平，否則會(huì)影響工作效果。
5、變幅桿選擇開關(guān)是用來(lái)匹配不同規(guī)格的變幅桿與發(fā)生器的頻率，阻抗的一致性。如換能器組件的頻率與發(fā)生器的阻抗不一致時(shí)，超聲波就不能工作。
6、不需預(yù)熱，使用應(yīng)有良好的接地。
7、在超聲破碎時(shí)，由于超聲波在液體中起空化效應(yīng)，使液體溫度會(huì)很快升高，用戶對(duì)各種細(xì)胞的溫度要多加注意。建議采用短時(shí)間(每次不超過5秒)的多次破碎，同時(shí)可外加冰浴冷卻。
8、超聲波細(xì)胞破碎儀采用無(wú)工頻變壓器的開關(guān)電源，在打開發(fā)生器機(jī)殼后切勿亂摸，以防觸電。本儀器性能可靠，一般不易損壞。 9、超聲波細(xì)胞破碎儀應(yīng)安放在干燥，無(wú)潮濕、無(wú)陽(yáng)光直射、無(wú)腐蝕性氣體的地方工作。
10、短時(shí)間的多次工作，工作時(shí)間1-2秒，間隙時(shí)間1-2秒，比連續(xù)長(zhǎng)時(shí)間工作的效果要好。為防止液體發(fā)熱，可設(shè)定較長(zhǎng)的間隙時(shí)間。
日常保養(yǎng)：用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲！
維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程
1如果探頭必須與固體樣品接觸，請(qǐng)使用切成70毫米長(zhǎng)的20毫米直徑不銹鋼管。不要用玻璃管
2微端頭只能與液接觸，不得與其它物體接觸
3在每次使用前，把探頭端頭放在水或者酒精中并且通電源數(shù)秒以去除殘余物
4探頭可以用高壓蒸鍋消毒，也可以浸入開水中消毒，也可以用消毒滅菌劑消毒
5不得把錐形微端頭用在連接器上。沒有連接器不要用直端頭。在處理低表面張力液體時(shí)不得使用帶螺紋端和可更換的端頭的探頭
關(guān)于超聲波細(xì)胞破碎儀的相關(guān)注意問題介紹細(xì)菌工程菌胞內(nèi)表達(dá)主要分為兩種形式，一種是在強(qiáng)啟動(dòng)子條件下的高效表達(dá)，由于蛋白的過度表達(dá);
使蛋白不能及時(shí)有效折疊而發(fā)生無(wú)規(guī)則卷曲，以固體顆粒的形式堆積于胞間質(zhì)中，這就是所說的包涵體;
另外一種是間質(zhì)內(nèi)的可溶性表達(dá)，即可以發(fā)生正常折疊，具有生物活性。
一般情況下，細(xì)菌只要被正常破壁就可以通過離心的形式將包涵體和可溶性表達(dá)的蛋白分離開。
超聲破碎的條件一般是300w，10s/10s，20分鐘，具體條件可根據(jù)自身情況而定。
超聲前菌體的準(zhǔn)備：菌液離心后，先用PBS將菌沉淀洗2-3遍;
然后按原菌液體積的1/5-1/10加入裂解液重懸菌體，裂解液的成分：
50mMTris-HCl,pH8.0,2mMEDTA，100mMNaCl，加至100ug/ml，0.1%TritonX-100。切記冰浴超聲！
如何判斷是否超聲，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，一般有以下幾個(gè)方面：
1，外觀判斷：超聲前菌懸液是渾濁的，超聲后變的透明、清澈。
2，液體的粘性：超聲后菌液從槍頭滴下不粘連。
3，高速離心：有用高速離心檢測(cè)超聲破碎程度的（一般用6,000g10min,比一般離心收集菌體的轉(zhuǎn)速高一點(diǎn)）。沉淀是未破碎或破碎不的菌體。
4，染色：破碎后的菌液涂片，革蘭氏結(jié)晶紫溶液染色0.5分鐘，鏡檢。
（超聲后加入核酸酶消除核酸對(duì)蛋白的污染）
一些需要注意的問題：
1，蛋白以包涵體形式表達(dá)，追求的是高破碎率，要求細(xì)胞碎片很小;
而另一種蛋白是可溶形式表達(dá)，所以細(xì)胞碎片不能很小，兩種情況要求不同但目的相同，都是便于后期的固液分離。
2，如果超聲時(shí)出現(xiàn)黑色沉淀，說明超聲功率太強(qiáng)。
3，超聲時(shí)間太長(zhǎng)、功率太高對(duì)蛋白活性肯定有影響。
4，盡量防止泡沫的產(chǎn)生。