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江蘇菲亞生物科技有限公司
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抗生素的介紹
2017-3-9 閱讀(1132)
在細(xì)胞培養(yǎng)中zui常用的抗生素是青霉素（常用濃度是25~100ui/ml）與鏈霉素（25~100μg/ml）。這兩種抗生素?；旌鲜褂?。在一些實(shí)驗(yàn)室里，它們常規(guī)加入所有的培養(yǎng)基中。慶大霉素（10~100μg/ml）通常有廣譜抗菌效應(yīng)，并具有溶液穩(wěn)定性，故也被一些實(shí)驗(yàn)室使用，特別是當(dāng)有低水平的污染存在時(shí)更是這樣。以上這些試劑對霉菌與酵母菌的污染均無效。
盡管很多實(shí)驗(yàn)室在細(xì)胞系的培養(yǎng)基中常規(guī)加入抗生素作繼代培養(yǎng)，但仍建議不要在原代培養(yǎng)中加入抗生素，其理由之一是獲得的細(xì)胞是無菌的，原代培養(yǎng)時(shí)的細(xì)菌污染很少發(fā)生。其次，盡管認(rèn)為抗生素對細(xì)胞代謝的影響可忽略，但避免使用它們，以免細(xì)胞生長環(huán)境的不穩(wěn)定。zui重要的是要意識到培養(yǎng)中主要污染物的類型，它們通常暗示了問題的來源。
抗有絲分裂劑
某些DNA合成抑制劑對分裂細(xì)胞有毒，但對沒有DNA合成的細(xì)胞僅有輕微影響。由于神經(jīng)元通常缺乏DNA合成能力，因此對抗有絲分裂劑沒有多大反應(yīng)。這樣的試劑常常用于神經(jīng)元的培養(yǎng)，以消除或減少非神經(jīng)元群體。若要?dú)⑺浪械姆巧窠?jīng)元細(xì)胞，可以先加入血清或生長因子來保證有高比例的非神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行DNA合成，此時(shí)再加入抗有絲分裂劑。但是，某些細(xì)胞在它的細(xì)胞周期的某些時(shí)相時(shí)對抗有絲分裂劑是不敏感的。不過，可以重復(fù)的將抗有絲分裂劑使用于增殖的細(xì)胞群體。在CNS神經(jīng)元的培養(yǎng)中抗有絲分裂劑常常在星形細(xì)胞形成單層后加入，此時(shí)，星形細(xì)胞由于接觸抑制而終止了DNA的合成（即細(xì)胞停止增殖），它們不會因抗有絲分裂劑的加入而死亡。原代培養(yǎng)中用這種方法阻止成纖維細(xì)胞的過度增殖是十分必要的。有兩種抗有絲分裂劑常用于神經(jīng)元的培養(yǎng)： Fluorodexyuridine，是胸苷合成酶抑制劑，一般使用濃度為～10μM。尿苷（10μM）也常使用，可阻止不分裂細(xì)胞的RNA合成。另外，阿糖胞苷也常被使用，其使用濃度為5～50μM。使用任何一種抗有絲分裂劑，都必須考慮它的神經(jīng)原毒性，應(yīng)該確定zui低效應(yīng)的使用濃度。阿糖胞苷在很低的濃度下，也會對某些種類的神經(jīng)元有毒性，可以造成特定神經(jīng)原的死亡。其他的抗有絲分裂劑尚未表現(xiàn)出這種毒性。
