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沙門氏菌顯色培養(yǎng)基使用方法

2017-9-11  閱讀(1725)

蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;膽鹽抑制革蘭氏陽性菌;選擇性添加劑增強(qiáng)培養(yǎng)基的抑制雜菌的能力;混合色素分別與沙門氏菌和大腸菌群所對應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng),水解底物,釋放出顯色基團(tuán),在淡黃色平板上沙門氏菌產(chǎn)生品紅色的菌落,大腸菌群產(chǎn)生藍(lán)綠色的菌落。 

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基使用方法:

1、稱取本品47.5g,混合均勻加熱至100℃,并按常規(guī)不斷攪拌直至*溶解(不能持續(xù)高溫加熱,建議不要重復(fù)煮溶),不需高壓滅菌,冷至50℃,加入10支沙門氏菌選擇性添加劑(凍干粉每支需先用1ml無菌水溶解),混勻,傾注滅菌平皿。

2、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液與增菌液。

3、建議使用二步增菌法:

(1)前增菌:將處理過的樣品25g置于225mL緩沖蛋白胨水中,混合均勻后37℃培養(yǎng)6~8h;

(2)選擇性增菌:取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)中,混合均勻后37℃培養(yǎng)18~24h;

4、用接種環(huán)取增菌液一環(huán),劃線接種于沙門氏菌顯色平板上,置于36±1℃培養(yǎng)18-24小時。

5、觀察結(jié)果。挑取顯色平板上呈品紅色,扁平透明,邊緣光滑,直徑約2mm的可疑菌落進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)。

6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗(yàn),對疑似沙門氏菌菌落進(jìn)行生化鑒定。



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