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江蘇菲亞生物科技有限公司
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菲亞：除去胎牛血清中脂肪酸的方法
2018-12-17 閱讀(1368)
胎牛血清是常見的實驗室培養(yǎng)基營養(yǎng)液，在大部分試驗中是不需要對胎牛血清中的脂肪酸進行去除的，但是，在進行某些特殊細胞培養(yǎng)的時候為了保證實驗的準確性和我們要讀胎牛血清中的某些成分進行去除，常見的脂肪酸去除，我們一般用一下方法：
1、溶解。取適量的胎牛血清白蛋白提取物，溶解于10倍的蒸餾水中，溶解溫度在23~27℃。 用濃度為0.2N的HCl，調(diào)節(jié)PH至3~3.5。
2、解析。充分溶解后的溶液胎牛血清白蛋白移至冰水混合物中進行冰水浴，同時持續(xù)攪拌，維持30min。
3、吸附。加入5%的活性炭，混勻，混懸液將混懸液移至冰水混合物中進行冰水浴，同時持續(xù)攪拌，維持1小時。過濾，濾渣回收后再利用。
4、濃縮。濾液用0.2N的NaOH調(diào)節(jié)PH值至7.0，然后用20000分子量以下的超濾器進行超濾濃縮。
5、凍干。將濃縮液按凍干曲線凍干，即將超濾后的濃縮液迅速冷凍至-40℃，持續(xù)1小時左右，升到-25℃，持續(xù)10～20小時，再緩慢升溫至０℃，維持１～４小時，升溫至保存溫度20℃，分裝為成品。
