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江蘇菲亞生物科技有限公司
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菲亞——無血清培養(yǎng)基所對應(yīng)細胞培養(yǎng)的適應(yīng)
2019-4-10 閱讀(1480)
有兩種方法可以使細胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基(SFM):
1.直接適應(yīng)法式—將細胞直接從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無血清培養(yǎng)基中。
2.連續(xù)適應(yīng)或循序隔絕法—分幾步將細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換到無血清培養(yǎng)基中。與直接適應(yīng)法相比較，連續(xù)適應(yīng)法對于細胞更溫和些。
為了使細胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基，關(guān)鍵是細胞培養(yǎng)應(yīng)滿足以下條件：
1.處于對數(shù)生長中期
2.存活率大于90%
3.在適應(yīng)期間，以較高的初始細胞接種量進行接種下面列出了常規(guī)適應(yīng)步驟。初始細胞接種量、細胞產(chǎn)量和培養(yǎng)周期是連續(xù)優(yōu)化的良好開端。
有些類型的細胞可以直接從含有血清培養(yǎng)基適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。對于直接適應(yīng)，細胞接種量應(yīng)在2.5 x 105 -3.5 x 105細胞/ml范圍內(nèi)，當(dāng)細胞密度達到1 x 106-3 x 106細胞/ml時，傳代培養(yǎng)細胞。培養(yǎng)4至7天后，當(dāng)細胞密度達到2 x 106 -4 x 106細胞/ml時，細胞已*適應(yīng)了無血清培養(yǎng)基。當(dāng)細胞密度達到1x 106 -3 x 106細胞/ml且存活率為90%時，應(yīng)當(dāng)每隔3到5天再次將適應(yīng)了無血清培養(yǎng)基的貯存細胞在無血清培養(yǎng)基中進行傳代培養(yǎng)。
