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上海研盟生物科技有限公司Anti-FBXW5抗體*,主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細胞術(shù)等實驗中。說明書隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線客服索取??头?/span>
英文名稱:Anti-FBXW5 antibody
中文名稱:FBXW5蛋白抗體
FBXW5蛋白抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
FBXW5蛋白抗體,Anti-FBXW5抗體抗原修復(fù)方法:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫。
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,?;?min,中火5min,自然冷卻至室溫。
方法3:高壓修復(fù),修復(fù)液加入高壓鍋加熱至沸騰,放入玻片,封蓋加壓持續(xù)加熱至噴氣時開始計時修復(fù)2min,自然冷卻至室溫。
方法4:使用*修復(fù),將*修復(fù)液加入到組織上,37℃,消化30min
★研盟生物★FBXW5蛋白抗體,Anti-FBXW5抗體
Western-blotting試驗方法:
蛋白提樣品制備
1、 將培養(yǎng)液吸入至15 ml離心管中,于2500 rpm離心5 min。
2、 棄上清,加入5 ml PBS并用槍輕輕吹打洗滌,然后2500 rpm離心5 min。棄上清后用PBS重復(fù)洗滌一次。
3、 用槍吸干上清后,加100 μl裂解液(含PMSF)冰上裂解30 min,裂解過程中要經(jīng)常彈一彈以使細胞充分裂解。
4、將裂解液4℃、12000 rpm離心5 min,取上清分裝于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。
5、BCA法測蛋白濃度
SDS-PAGE電泳
1、 玻璃板對齊后放入夾中卡緊,然后垂直卡在架子上準備灌膠。
2、按前面方法配10%分離膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。灌膠時,可用10 ml槍吸取5 ml膠沿玻璃放出,待膠面升到綠帶中間線高度時即可。然后膠上加一層水,液封后的膠凝的更快。(灌膠時開始可快一些,膠面快到所需高度時要放慢速度。操作時膠一定要沿玻璃板流下,這樣膠中才不會有氣泡。加水液封時要慢,否則膠會被沖變型。)
3、 當水和膠之間有一條折射線時,說明膠已凝了。再等3 min使膠充分凝固就可倒去膠上層水并用吸水紙將水吸干。
4、 按方法配4%的濃縮膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。將剩余空間灌滿濃縮膠后將梳子插入孔槽。灌膠時也要使膠沿玻璃板流下以免膠中有氣泡產(chǎn)生。插梳子時要使梳子保持水平。待到濃縮膠凝固后,兩手分別捏住梳子的兩邊豎直向上輕輕將其拔出。
5、 用水沖洗濃縮膠,將其放入電泳槽中。
6、 測完蛋白含量后,計算含20-50 μg蛋白(根據(jù)自己的實驗需要進行選擇,沒有固定的量)的溶液體積即為上樣量。取出上樣樣品至200 μl的EP管中,加入5×SDS 上樣緩沖液至終濃度為1×。上樣前要將樣品于沸水中煮5-10 min使蛋白變性。
7、 加入足夠的電泳緩沖液后開始準備上樣。(電泳液至少要漫過內(nèi)測的小玻璃板。)用微量進樣器貼壁吸取樣品,將樣品吸出不要吸進氣泡。將加樣器針頭插至加樣孔中緩慢加入樣品(包括一孔做可視的蛋白marker)。(加樣太快可使樣品沖出加樣孔,若有氣泡也可能使樣品溢出。加入下一個樣品時,進樣器需在外槽電泳緩沖液中洗滌數(shù)次,以免交叉污染)
8、電泳:濃縮膠時用80-100 V跑,到分離膠以后用150-200 V跑,總時間2 h左右,電泳至溴酚蘭剛跑出即可終止電泳,進行轉(zhuǎn)膜。
簡單介紹:
產(chǎn)品別名:F box and WD 40 domain containing protein 5; F box and WD repeat domain containing 5; FBW5; FBXW5_HUMAN.
抗體來源:Rabbit or Mouse
保質(zhì)期:1年
克隆類型:Polyclonal or monoclonal
性 狀:Lyophilized or Liquid
濃 度:1mg/1ml
背景介紹:FBXW5 is a member of the F-box protein family, members of which are characterized by an approximay 40 amino acid motif, the F-box. The F-box proteins constitute one of the four subunits of ubiquitin protein ligase complex called SCFs (SKP1-cullin-F-box), which function in phosphorylation-dependent ubiquitination. The F-box proteins are divided into three classes: Fbws containing WD-40 domains, Fbls containing leucine-rich repeats, and Fbxs containing either different protein-protein interaction modules or no recognizable motifs. FBXW5 contains WD-40 domains, in addition to an F-box motif, so it belongs to the Fbw class. Alternatively spliced transcript variants encoding distinct isoforms have been identified for this gene, however, they were found to be nonsense-mediated mRNA decay (NMD) candidates, hence not represented.
新學(xué)期開學(xué)大減價*:
Anti-C5R1 補體成分5受體1抗體
Anti-TrkA/B/C *激酶A/B/C抗體
Anti-TrkA/NTRK1 *激酶A抗體
Anti-TRIM32/BBS11 神經(jīng)干細胞抑制相關(guān)蛋白TRIM32抗體
Anti-omerase Binding Protein, P23 端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體
Anti-ABLIM3 肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體
Anti-TRF2 端粒結(jié)合蛋白2抗體
Anti-OLIG3 少突膠質(zhì)細胞轉(zhuǎn)錄因子3抗體
Anti-5HT3D+5HT3E Receptor 5-羥色胺受體3D+3E抗體
Anti-Transferrin 轉(zhuǎn)鐵蛋白/血清鐵傳遞蛋白抗體
Anti-TRBF1/TRF1 端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體
Anti-PCDHGA11 原鈣粘蛋白γA11抗體
Anti-Transthyretin/Prealbumin 轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體
Anti-Desmoglein 2 橋粒芯糖蛋白2抗體
Anti-TRAIL 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體
Anti-Nfasc186 神經(jīng)束蛋白186抗體
Anti-TRAF6 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體
Anti-MOBP 少突膠質(zhì)細胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體
Anti-TRAF3/CD40bp 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體
Anti-Cytokeratin 10+14+17+19+42 細胞角蛋白19,17,14,42,10抗體