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上海研盟生物科技有限公司Anti-KRT35抗體*,主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中。說(shuō)明書隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線客服索取??头?/span>
英文名稱:Anti-KRT35 antibody
中文名稱:KRT35蛋白抗體
KRT35蛋白抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
KRT35蛋白抗體,Anti-KRT35抗體抗原修復(fù)方法:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫。
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,?;?min,中火5min,自然冷卻至室溫。
方法3:高壓修復(fù),修復(fù)液加入高壓鍋加熱至沸騰,放入玻片,封蓋加壓持續(xù)加熱至噴氣時(shí)開始計(jì)時(shí)修復(fù)2min,自然冷卻至室溫。
方法4:使用*修復(fù),將*修復(fù)液加入到組織上,37℃,消化30min
★研盟生物★KRT35蛋白抗體,Anti-KRT35抗體
Western-blotting試驗(yàn)方法:
蛋白提樣品制備
1、 將培養(yǎng)液吸入至15 ml離心管中,于2500 rpm離心5 min。
2、 棄上清,加入5 ml PBS并用槍輕輕吹打洗滌,然后2500 rpm離心5 min。棄上清后用PBS重復(fù)洗滌一次。
3、 用槍吸干上清后,加100 μl裂解液(含PMSF)冰上裂解30 min,裂解過(guò)程中要經(jīng)常彈一彈以使細(xì)胞充分裂解。
4、將裂解液4℃、12000 rpm離心5 min,取上清分裝于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。
5、BCA法測(cè)蛋白濃度
SDS-PAGE電泳
1、 玻璃板對(duì)齊后放入夾中卡緊,然后垂直卡在架子上準(zhǔn)備灌膠。
2、按前面方法配10%分離膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。灌膠時(shí),可用10 ml槍吸取5 ml膠沿玻璃放出,待膠面升到綠帶中間線高度時(shí)即可。然后膠上加一層水,液封后的膠凝的更快。(灌膠時(shí)開始可快一些,膠面快到所需高度時(shí)要放慢速度。操作時(shí)膠一定要沿玻璃板流下,這樣膠中才不會(huì)有氣泡。加水液封時(shí)要慢,否則膠會(huì)被沖變型。)
3、 當(dāng)水和膠之間有一條折射線時(shí),說(shuō)明膠已凝了。再等3 min使膠充分凝固就可倒去膠上層水并用吸水紙將水吸干。
4、 按方法配4%的濃縮膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。將剩余空間灌滿濃縮膠后將梳子插入孔槽。灌膠時(shí)也要使膠沿玻璃板流下以免膠中有氣泡產(chǎn)生。插梳子時(shí)要使梳子保持水平。待到濃縮膠凝固后,兩手分別捏住梳子的兩邊豎直向上輕輕將其拔出。
5、 用水沖洗濃縮膠,將其放入電泳槽中。
6、 測(cè)完蛋白含量后,計(jì)算含20-50 μg蛋白(根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行選擇,沒有固定的量)的溶液體積即為上樣量。取出上樣樣品至200 μl的EP管中,加入5×SDS 上樣緩沖液至終濃度為1×。上樣前要將樣品于沸水中煮5-10 min使蛋白變性。
7、 加入足夠的電泳緩沖液后開始準(zhǔn)備上樣。(電泳液至少要漫過(guò)內(nèi)測(cè)的小玻璃板。)用微量進(jìn)樣器貼壁吸取樣品,將樣品吸出不要吸進(jìn)氣泡。將加樣器針頭插至加樣孔中緩慢加入樣品(包括一孔做可視的蛋白marker)。(加樣太快可使樣品沖出加樣孔,若有氣泡也可能使樣品溢出。加入下一個(gè)樣品時(shí),進(jìn)樣器需在外槽電泳緩沖液中洗滌數(shù)次,以免交叉污染)
8、電泳:濃縮膠時(shí)用80-100 V跑,到分離膠以后用150-200 V跑,總時(shí)間2 h左右,電泳至溴酚蘭剛跑出即可終止電泳,進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。
簡(jiǎn)單介紹:
產(chǎn)品別名:Hair keratin; Hair keratin, type I Ha5; HHA5; HKA5; K35; Keratin; Keratin, type I cuticular Ha5; Keratin-35; KRT35; KRT35_HUMAN; KRTHA5; type I cuticular Ha5; type I Ha5.
抗體來(lái)源:Rabbit or Mouse
保質(zhì)期:1年
克隆類型:Polyclonal or monoclonal
性 狀:Lyophilized or Liquid
濃 度:1mg/1ml
背景介紹:The protein encoded by this gene is a member of the keratin gene family. This type I hair keratin is an acidic protein which heterodimerizes with type II keratins to form hair and nails. The type I hair keratins are clustered in a region of chromosome 17q12-q21 and have the same direction of transcription.
新學(xué)期開學(xué)大減價(jià)*:
Anti-C5R1 補(bǔ)體成分5受體1抗體
Anti-TrkA/B/C *激酶A/B/C抗體
Anti-TrkA/NTRK1 *激酶A抗體
Anti-TRIM32/BBS11 神經(jīng)干細(xì)胞抑制相關(guān)蛋白TRIM32抗體
Anti-omerase Binding Protein, P23 端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體
Anti-ABLIM3 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體
Anti-TRF2 端粒結(jié)合蛋白2抗體
Anti-OLIG3 少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子3抗體
Anti-5HT3D+5HT3E Receptor 5-羥色胺受體3D+3E抗體
Anti-Transferrin 轉(zhuǎn)鐵蛋白/血清鐵傳遞蛋白抗體
Anti-TRBF1/TRF1 端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體
Anti-PCDHGA11 原鈣粘蛋白γA11抗體
Anti-Transthyretin/Prealbumin 轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體
Anti-Desmoglein 2 橋粒芯糖蛋白2抗體
Anti-TRAIL 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體
Anti-Nfasc186 神經(jīng)束蛋白186抗體
Anti-TRAF6 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體
Anti-MOBP 少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體
Anti-TRAF3/CD40bp 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體
Anti-Cytokeratin 10+14+17+19+42 細(xì)胞角蛋白19,17,14,42,10抗體