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骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I抗體,Anti-Tnni1抗體

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更新時(shí)間:2019-02-19 14:23:20瀏覽次數(shù):147次

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上海研盟生物科技有限公司Anti-Tnni1抗體*,主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中。說(shuō)明書隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線客服索取??头?/span>

英文名稱:Anti-Tnni1 antibody

中文名稱:骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I抗體

骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I抗體,Anti-Tnni1抗體抗原修復(fù)方法:

方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫。
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,?;?min,中火5min,自然冷卻至室溫。
方法3:高壓修復(fù),修復(fù)液加入高壓鍋加熱至沸騰,放入玻片,封蓋加壓持續(xù)加熱至噴氣時(shí)開始計(jì)時(shí)修復(fù)2min,自然冷卻至室溫。
方法4:使用*修復(fù),將*修復(fù)液加入到組織上,37℃,消化30min

 

★研盟生物★骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I抗體,Anti-Tnni1抗體

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

1、 把聚丙烯酰胺凝膠中的蛋白質(zhì)電泳轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上;

a. 轉(zhuǎn)移緩沖液洗滌凝膠和硝酸纖維素膜,將硝酸纖維素膜鋪在凝膠上,用5ml移液管在凝膠上來(lái)回滾動(dòng)去除所有的氣泡

b. 在凝膠/濾膜外再包一張3mm濾紙(預(yù)先用轉(zhuǎn)移緩沖液浸濕),將凝膠夾在中間,保持濕潤(rùn)和沒(méi)有氣泡

c. 將此濾紙/凝膠/薄膜濾紙按照廠家建議方法放入電泳裝置中,凝膠面向陰極

d. 將上述裝置放入緩沖液槽中,并灌滿轉(zhuǎn)移緩沖液以淹沒(méi)凝膠

e. 按照廠家所示接通電源開始電泳轉(zhuǎn)移

f. 轉(zhuǎn)移結(jié)束后,取出薄膜和凝膠,棄去凝膠

2、 將薄膜漂在氨基黑中快速染色,直至分子量標(biāo)準(zhǔn)顯現(xiàn)時(shí)取出,記錄下標(biāo)準(zhǔn)位置;

3、 用100ml水洗滌纖維素膜,必要時(shí)可用脫色緩沖液;

4、 膜置印跡緩沖液中于37℃保溫1小時(shí);

5、 室溫下,用PBS-Tween緩沖液洗滌薄膜

6、 用封口機(jī)將薄膜封入塑料袋中,盡可能不留空氣;

7、 袋的一角剪一緩沖液的小口,用透析袋夾緊;

8、 混合:NGS(100微升),印跡緩沖液中的抗體(2.5-5毫升),加在裝薄膜的袋中,于室溫下?lián)u動(dòng)2小時(shí)(或4℃過(guò)ye);

9、 用總體積300ml PBS-Tween緩沖液,分4次在一淺盤中洗滌薄膜,每次75ml;

10、將連接*的羊抗兔IgG(40微升溶于10毫升印跡緩沖液/100微升 NGS)加在袋內(nèi),于室溫下?lián)u動(dòng)1小時(shí);

11、按步驟9洗滌;

12、加入抗生素蛋白-HRP(40微升溶于10毫升印跡緩沖液/100微升 NGS),于室溫下?lián)u動(dòng);

13、Western Blot中轉(zhuǎn)移在膜上的蛋白處于變性狀態(tài),空間結(jié)構(gòu)改變,因此那些識(shí)別空間表位的抗體不能用于Western Blot檢測(cè)。這種情況可以將表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞或細(xì)胞裂解液中的所有蛋白物素化,再用酶標(biāo)記親和素進(jìn)行Western Blot。實(shí)驗(yàn)中取膠和膜需帶手套。

 

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簡(jiǎn)單介紹:

產(chǎn)品別名:Troponin I, slow skeletal muscle; SSTNI; TNN1; TNNI1_MOUSE; Troponin I slow skeletal muscle; Troponin I, slow twitch isoform.      

抗體來(lái)源:Rabbit or Mouse

保質(zhì)期:1年

克隆類型:Polyclonal or monoclonal

性    狀:Lyophilized or Liquid

濃    度:1mg/1ml

背景介紹:Troponin proteins associate with tropomyosin and regulate the calcium sensitivity of the myofibril contractile apparatus of striated muscles. Troponin I (TnI), along with troponin T (TnT) and troponin C (TnC), is one of 3 subunits that form the troponin complex of the thin filaments of striated muscle. TnI is the inhibitory subunit; blocking actin-myosin interactions and thereby mediating striated muscle relaxation. The TnI subfamily contains three genes: TnI-skeletal-fast-twitch, TnI-skeletal-slow-twitch, and TnI-cardiac. The TnI-fast and TnI-slow genes are expressed in fast-twitch and slow-twitch skeletal muscle fibers, respectively, while the TnI-cardiac gene is expressed exclusively in cardiac muscle tissue. This gene encodes the Troponin-I-skeletal-slow-twitch protein. This gene is expressed in cardiac and skeletal muscle during early development but is restricted to slow-twitch skeletal muscle fibers in adults. The encoded protein prevents muscle contraction by inhibiting calcium-mediated conformational changes in actin-myosin complexes. 

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