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人蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)

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所在地上海市

更新時(shí)間:2017-03-31 19:36:16瀏覽次數(shù):262次

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人蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)

產(chǎn)品名稱:人蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)

產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T

檢測(cè)方法: ELISA酶聯(lián)免疫法

說 明 書:隨貨發(fā)送,也可直接在線銷售索取

測(cè)試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬

檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

試劑盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6個(gè)月。

產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口/國產(chǎn)

產(chǎn)品庫存:現(xiàn)貨供應(yīng)

品牌:自主研發(fā)/進(jìn)口原裝

產(chǎn)品價(jià)格:*,洽談!

試劑盒使用范圍:僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.

人蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)產(chǎn)品價(jià)格:*,洽談!

酶聯(lián)免疫法試劑盒定性定量檢測(cè)一步到位,可同時(shí)大批量完成多種屬的檢測(cè)工作,而且一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,正規(guī)專業(yè)的我們,一定能幫您,將實(shí)驗(yàn)做得更好,更精確。試驗(yàn)過程中,如有任何疑問都可和我們,無論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優(yōu)質(zhì)服務(wù)進(jìn)行到底。

供應(yīng)商:上海繁旌生物科技有限公司

上海繁旌生物ELISA試劑盒*優(yōu)勢(shì):

1、采用全進(jìn)口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴(yán)格引進(jìn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行批量生產(chǎn)。

2、*的優(yōu)化方案:重復(fù)性高,可靠性。

3、技術(shù)服務(wù):專業(yè),及時(shí),耐心。

4、現(xiàn)貨供應(yīng):江浙滬隔天到貨,外地3-5天到貨。

 

蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)

液體樣本中* 1(KLK-1)的含量。

實(shí)驗(yàn)原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人* 1(KLK-1)水平。用純化的人激肽釋

放酶 1(KLK-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入*

1(KLK-1),再與 HRP 標(biāo)記的* 1(KLK-1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合

物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作

用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的* 1(KLK-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀

 450nm 波長下測(cè)定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人* 1(KLK-1)

濃度。

試劑盒組成:

試劑盒組成 48 孔配置 96 孔配置 保存

說明書 1  1 

封板膜 2 片(48 2 片(96)

密封袋 1 個(gè) 1 個(gè)

酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品:27ng/ml 0.5ml×1  0.5ml×1  2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1  1.5ml×1  2-8℃保存

酶標(biāo)試劑 3 ml×1  6 ml×1  2-8℃保存

樣品稀釋液 3 ml×1  6 ml×1  2-8℃保存

顯色劑 A  3 ml×1  6 ml×1  2-8℃保存

顯色劑 B 液 3 ml×1  6 ml×1  2-8℃保存

終止液 3ml×1  6ml×1  2-8℃保存

20 倍濃縮洗滌液 20ml×1  30ml×1  2-8℃保存

樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上

清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心

20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次

離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程

中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/

1分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用 PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞

濃度達(dá)到 100 /ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 

鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?/span>

用。標(biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器

將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待

檢測(cè),其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上

進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)

準(zhǔn)品 100µl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl,混勻;然后從*孔、第二

孔中各取 100µl 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl,

混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50µl 棄掉,再各取 50µl 分別加到第五、第六孔

中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各

50µl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl,混

勻后從第七、第八孔中分別取 50µl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)

品稀釋液 50µl,混勻后從第九第十孔中各取 50µl 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50µl,

濃度分別為 18ng/ml12ng/ml,6ng/ml,3ng/ml, 1.5 ng/ml)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣

品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl(樣

品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混

勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液:將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

重復(fù) 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同 3。

8. 洗滌:操作同 5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止

液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

注意事項(xiàng):

1 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未

用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間

控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。

4 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)

 

算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6 底物請(qǐng)避光保存。

7 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的 OD

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 

代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

(此圖僅供參考)

試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值為 0.990 以上。

2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于 9%和 11%

檢測(cè)范圍:

0.8ng/ml  20ng/ml

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6 個(gè)月

 

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