人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA 試劑盒

包裝規(guī)格：48T/96T

檢測方法：酶聯(lián)免疫

檢測標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液等

本試劑盒僅供科研使用!

試劑盒組成

人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA 試劑盒  需要而未提供的試劑和器材

1.   酶標(biāo)儀(450nm檢測波長濾光片，570nm或630nm校正波長濾光片) 。

2.   洗板機(jī)（可調(diào)注液量，保證每孔洗液加至0.35ml而不溢出）。

3.   超凈工作臺(tái)，生物安全柜，通風(fēng)柜。

4.   高精度單道加液器（量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).

5.   高精度多道加液器（8道或12道，量程為50-300μl).

6.   37℃恒溫箱。

7.   低溫離心機(jī)。

8.   電冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.

9.  漩渦混合儀，低頻振蕩器等

注意事項(xiàng)

1． 從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2． 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

3． 為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。

4． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

5． 底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。

6.   所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按生物廢棄物處理。終止液為2M硫酸，使用時(shí)必須注意安全。

7.  各步驟加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校準(zhǔn)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

8.  每次試驗(yàn)測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔zui高濃度的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n）。

9.  配制試劑時(shí)，要用旋渦混合儀混勻。加入孔內(nèi)的試劑，充分混勻?qū)y試結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)前手工輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板1分鐘，例如做圓周動(dòng)作，使加入孔中的反應(yīng)液混勻。

10.  實(shí)驗(yàn)用酶標(biāo)儀應(yīng)嚴(yán)格按使用說明書規(guī)范操作，并在使用前充分預(yù)熱。

11.  手工洗板應(yīng)注意：甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。

人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA 試劑盒    樣本要求

1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存或根據(jù)存放，時(shí)間做相應(yīng)溫度調(diào)整，但應(yīng)避免反復(fù)凍融，（由于樣本種類過多，每個(gè)單位處理方式不一樣，本說明書不做詳細(xì)介紹）。

操作程序

1． 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：（本試劑系統(tǒng)提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶請按照說明自行在小試管中倍比稀釋）按下表格執(zhí)行：

2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3． 加樣:(詳細(xì)操作流程請客服索要說明書）

4． 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋備用。

5． 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6． 顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。

7． 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

8． 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA 試劑盒     結(jié)果判斷

1.  每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值應(yīng)減去零孔的OD值。（若不減零孔值，標(biāo)準(zhǔn)曲線的零孔應(yīng)相交于Y軸）

2. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種熟悉應(yīng)用軟件來計(jì)算。

3．手工繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，OD值作縱坐標(biāo)，以平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品的坐標(biāo)點(diǎn)。通過標(biāo)本的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。*使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析計(jì)算結(jié)果。

4．若標(biāo)本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測，計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

試劑盒性能

1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9200。

2. 靈敏度：zui小可檢測濃度達(dá)，1.05ng/ml。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5 . 回收率：70-110%.

6. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

7. 有效期：6個(gè)月

8. 檢測范圍： 480ng/ml -3.9ng/ml

人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA 試劑盒        其他產(chǎn)品：

  與人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒相關(guān)的ELISA試劑盒產(chǎn)品還有：張女士 蘇州系統(tǒng)醫(yī)學(xué)研究所合作單位

　　人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA測定試劑盒，name：Interferon β，IFN-β/IFNB ELISA Kit ，規(guī)格：96T/48T   劉 清華大學(xué)

　　人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA測定試劑盒，name：transforming growth factors β2，TGFβ2 ELISA Kit，規(guī)格：96T/48T   張 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)

　　人白三烯D4(LTD4)ELISA測定試劑盒，name：leukotriene D4，LT-D4 ELISA Kit，規(guī)格：96T/48T   杭州浙二醫(yī)院   陳

　　人生長激素釋放因子(GH-RF)ELISA測定試劑盒，name：growth hormone relasing factor，GH-RF ELISA Kit，規(guī)格：96T/48T   山西臨猗李大夫皮膚病專科醫(yī)院

　　人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA測定試劑盒，name：macrophage chemotatic factor，MCF ELISA Kit，規(guī)格：96T/48T   張女士  湖南生物機(jī)電職院

　　人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA測定試劑盒，name：Interferon α/βReceptor，IFN-α/βR ELISA Kit，規(guī)格：96T/48T  淄博市職業(yè)病醫(yī)院

　　人B細(xì)胞生長因子(BCGF)ELISA測定試劑盒，name：B cell growth protein，BCGF ELISA Kit，規(guī)格：96T/48T  何老師 天津254醫(yī)院

　　人可溶性粘附分子(Sam)ELISA測定試劑盒，name：soluble adhesion molecules，Sam ELISA Kit，規(guī)格：96T/48T   方  西安德祥商貿(mào)有限公司

　　大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)Elisa試劑盒 ，英文名： ProstaticAcidPhosphatase，PAPELISAKit ，規(guī)格：96T/48T    東莞市第八人民醫(yī)院   郝醫(yī)生

　　大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)Elisa試劑盒 ，英名： Angiotensinconvertingenzyme，ACEELISAKit ，規(guī)格： 96T/48T    胡女士 山東省中醫(yī)院

　　大鼠尿蛋白(UP)Elisa試劑盒 ，英文名： Proteinuria，UPELISAKit ，規(guī)格： 96T/48T    中國農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所    楊教授

　　大鼠水通道蛋白2(AQP-2)Elisa試劑盒 ，英文名： Aquaporin2，AQP-2ELISAKit ，規(guī)格： 96T/48T   復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院   舒老師

　　大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)Elisa試劑盒 ，英文名： TroponinT，Tn-ISAKit ，規(guī)格： 96T/48T    於 華中科院

　　大鼠血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)Elisa試劑盒 ，英文名： anti-Endostatinantibody，ES-AbELISAKit ，規(guī)格：96T/48T   余老師  嘉興市南湖區(qū)中環(huán)南路

　　大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)Elisa試劑盒 ，英文名： heatshockprotein27，HSP-27ELISAKit ，規(guī)格：96T/48T   第二軍醫(yī)大學(xué) 俞老師

　　大鼠血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)Elisa試劑盒 ，英文名： angiostatin，ANGELISAKit ，規(guī)格： 96T/48T   宋 海思科制藥

　　兔堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(bFGF-9)Elisa試劑盒 ，英文名： basicfibroblastgrowthfactor9，bFGF-9ELISAKit ，規(guī)格： 96T/48T    周月 西南大學(xué)

　　兔E選擇素(E-Selectin/CD62E)Elisa試劑盒 ，英文名： E-SelectinELISAKit ，規(guī)格： 96T/48T    王老師  山東 濟(jì)南

　　兔鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)Elisa試劑盒 ，英文名： eosinophilchemotacticfactor，ECFELISAKit ，規(guī)格： 96T/48T   秦老師  蘇州科技大學(xué)

    兔CD30分子(CD30)Elisa試劑盒 ，英文名： Clusterofdifferentiation30，CD30ELISAKit ，規(guī)格： 96T/48T   李 深圳森科技有限公司

elisa試劑盒常見實(shí)驗(yàn)條件

如何正確使用酶結(jié)合物？ 
1.酶結(jié)合物的稀釋液 
在稀釋液中常加入高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)(例如1%BSA或5%脫脂奶粉),通過競爭抑制酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸附.一般還加入能夠抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑,如吐溫20(0.05%的濃度較為適宜). 

2.正確稀釋酶結(jié)合物 
酶結(jié)合物的合適工作濃度需要通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來確定,濃度過高易導(dǎo)致本底偏高,濃度過低則會(huì)導(dǎo)致陽性信號的減弱. 
酶結(jié)合物在使用前稀釋,稀釋后的酶結(jié)合物不宜*保存,因?yàn)榈蜐舛鹊拿附Y(jié)合物極易失活.