當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>技術文章>>進口檢測試劑盒對DNA合成常見問題及解答
Q: 進口檢測試劑盒怎樣對合成DNA制品進行定量?
A: DNA的量與260 nm處的吸光度值(OD值)成正比,因此使用紫外分光光度計定量是zui科學的。1個OD值的合成DNA的重量約為33 mg。
Q: 怎樣理解測定的OD值?
A: 進行OD值測定時,分光光度計上顯示的數值為每毫升溶液中的OD值。當測定200 ml溶液中的OD值為1.5時,溶液整體的OD量應該為多少?此時的OD值
= 1.5 OD/ml × 0.2 ml = 0.3 OD。
Q: 合成oligo DNA應怎樣保存?
A: 保存合成的Oligo應該注意以下幾點:
1. 干燥制品很穩(wěn)定,常溫下數個月無問題。但為保證*,放置于-20℃保存為好。
2. 溶解后的溶液DNA短期內(1-2周)使用可放置在4℃下保存,長期保存請放置于-20℃。溶解DNA時,請注意使用無菌、無核酸酶的水或TE Buffer。
3. 熒光標記引物請避光保存。
Q: 合成DNA溶液在室溫下放置了數天,還可以使用嗎?
A: 溶液中的Oligo DNA常溫下數天(3-4天)應該沒問題,但不要放置一個星期以上。其壽命受溶液中的菌體、核酸酶等的影響。
Q: 制品溶解后發(fā)現(xiàn)有少許沉淀,會影響實驗結果嗎?
A: 所有的制品純化后都要進行脫鹽,脫鹽是使用C18柱進行的,偶而會有微量的樹脂溢出而進入制品。樹脂不影響任何反應結果,請稍許離心后取上清使用。
Q: 測定了制品的OD值后發(fā)現(xiàn)A260/A280< 1.8,制品質量(純度)合格嗎?
A: Oligo DNA和一般提取的雙鏈DNA不同,A260/A280的比值不能準確衡量Oligo
DNA制品的質量,該比值依賴于序列中的各種堿基的組份,下表中列出了不同堿基組成的20mer的Oligo DNA的A260/A280比值。
因此,如果您測定了A260/A280的比值小于1.8時,是由于進口檢測試劑盒上述原因引起的。
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